Renpenning綜合征關(guān)聯(lián)分子PQBP1的功能研究.pdf

1、Renpenning綜合征是X染色體連鎖智力發(fā)育障礙(X-linked mentalretardation，XLMR)的一種，主要由多聚谷氨酰胺結(jié)合蛋白1(Polyglutaminebinding protein1，PQBP1)基因突變而致，但該基因在神經(jīng)發(fā)育過程中的生理功能尚不清楚。本論文以果蠅和細胞為模型，研究了PQBP1在視覺神經(jīng)發(fā)育中的功能和相應(yīng)分子機制。
　　首先我們檢測了果蠅PQBP1(dPQBP1)在視覺系統(tǒng)中的分布

2、及功能。免疫染色顯示dPQBP1主要分布于視網(wǎng)膜區(qū)，dPQBP1缺失突變導(dǎo)致果蠅感光細胞的rhabdomere結(jié)構(gòu)中微絨毛的密度及排列均出現(xiàn)異常，在視網(wǎng)膜電位圖(ERG)實驗中對光反應(yīng)振幅減小，這些缺陷可被外源表達在感光細胞中的dPQBP1所恢復(fù)，由此可見dPQBP1介導(dǎo)了果蠅rhabdomere的形態(tài)發(fā)生。隨后我們用免疫印跡及體外生化實驗證實dPQBP1缺失并沒直接影響rhabdomere中肌動蛋白微絲的組裝，而是下調(diào)了Chaopti

3、n等特定蛋白的表達。為了解析dPQBP1介導(dǎo)Chaoptin生物合成的分子機制，我們進一步利用細胞染色、質(zhì)譜、免疫沉淀-RT-PCR和密度梯度離心等方法，發(fā)現(xiàn)dPQBP1定位于感光細胞的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并且主要分布在含有RNPs、40S、60S核糖體亞基和80S單體核糖體的組份中，它作為mRNP與包括Chaoptin和BIP在內(nèi)的一些特定基因的mRNA相結(jié)合，負責將這些mRNA從mRNP復(fù)合體轉(zhuǎn)運到翻譯核糖體，參與這些分子的翻譯過程。我們同時