芍藥苷對SD大鼠膿毒癥性急性肝損傷模型Nrf2-γ-GCS表達的影響.pdf

1、背景：
　　膿毒癥是一種全身炎癥反應綜合征，易并發(fā)多器官功能衰竭。至今，膿毒癥仍具有高發(fā)病率、高治療費、高死亡率三大特點。膿毒癥性急性肝損傷（ALI）是膿毒癥重要的并發(fā)癥之一，直接影響預后。目前氧化應激反應失衡被認為是膿毒癥性ALI重要的發(fā)病機制之一。越來越多的研究證實芍藥苷（PF）在肝臟疾病中發(fā)揮抗氧化作用，Nrf2-ARE是機體重要的抗氧化系統(tǒng)，但PF是否對膿毒癥性ALI有保護作用，及通過調(diào)控Nrf2抗氧化通路發(fā)揮作用，目前國

2、內(nèi)外鮮有報道。
　　目的：
　　觀察PF對盲腸結(jié)扎穿孔（CLP）術誘導大鼠膿毒癥性ALI的保護作用，探索PF干預作用是否通過調(diào)控Nrf2/γ-GCS發(fā)揮抗氧化作用。
　　方法：
　　采用CLP術誘導建立膿毒癥性ALI大鼠模型。第一部分：將36只SD雄性大鼠隨機分成3組，每組12只，即假手術組、模型組、PF干預組。PF干預組術后立即予PF腹腔注射給藥（90mg/kg/d），用生理鹽水注射液配置，濃度為15mg/ml

3、，按等濃度不等體積注射。觀察造模處理后48h內(nèi)各組大鼠的一般情況，及時清點大鼠的存活數(shù)，計算存活率，繪制生存曲線及進行生存分析。第二部分：將30只SD雄性大鼠隨機分成3組，每組10只，分組及干預處理同上，術后6h處死存活鼠，留取血清標本，測定ALT水平；觀察肝臟大體形態(tài)及HE染色肝組織病理改變；用黃嘌呤氧化酶法測定SOD活力，硫代巴比妥酸法測定MDA含量；采用ELISA檢測肝組織TNF-α和IL-6水平。采用Western Blot檢測

4、Nrf2、γ-GCS蛋白表達；采用Real-Time PCR檢測Nrf2、γ-GCS mRNA的表達。
　　結(jié)果：
　?。?）與模型組比較，PF干預組大鼠48h存活率明顯提高（66.7％vs16.7%,p<0.05）；
　?。?）模型組較假手術組ALT值顯著升高（467.00±18.08 vs100.23±37.02,p＜0.01）；干預組較模型組明顯改善（365.11±13.22 vs467.00±18.08,p＜0

5、.01）。HE染色示假手術組大鼠肝臟病理改變不明顯，模型組可見肝細胞呈片灶狀壞死、肝血竇周圍大量炎癥細胞浸潤，PF干預組肝細胞點狀壞死，可見核分裂像提示較模型組明顯改善。
　?。?）與模型組比較，PF干預組肝組織勻漿 MDA含量均顯著降低（1.85±0.17 vs2.60±0.27,p<0.01）；肝組織勻漿 SOD活力明顯增強（2.65±0.11 vs1.58±0.24,p<0.01）；肝組織勻漿IL-6、TNF-α表達降低（3

6、77.80±48.39 vs644.50±59.59；701.95±72.30 vs969.46±81.52,p＜0.00）。
　?。?）與模型組比較，干預組肝組織Nrf2核蛋白、γ-GCS蛋白相對表達量（0.1073±0.012 vs0.0731±0.016,p=0.003、0.1124±0.021 vs0.0613±0.026,p＜0.01）及 Nrf2 mRNA、γ-GCS mRNA相對表達量（3.7758±0.557 vs