COX-2對(duì)膿毒癥大鼠肝損傷的影響.pdf

1、目的 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)動(dòng)物模型，研究環(huán)氧合酶2在膿毒癥大鼠的肝組織炎癥反應(yīng)中的表達(dá)及其干預(yù)劑NS-398的作用，旨在為臨床防治膿毒癥提供新思路，尤其是探索肝細(xì)胞的有效方法。 方法 選擇體重相近wistar 大鼠54只隨機(jī)分為3組： A假手術(shù)組；B膿毒癥模型組；C NS-398干預(yù)組。通過(guò)建立盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)膿毒癥動(dòng)物模型，用RT-PCR方法檢測(cè)肝組織COX-2 mRNA的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸

2、附法(ELISA法)檢測(cè)血清IL一6、TNF-α、IL-10水平變化，免疫組織化學(xué)法測(cè)定肝細(xì)胞NF-кB表達(dá)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群CD4+、CD8+細(xì)胞百分率的變化，同時(shí)觀察肝臟病理變化和肝功能改變。 結(jié)果 1．肝組織中 COX-2 mRNA在 A 組呈低表達(dá)(1040.82±2.77)；CLP造模后3h表達(dá)明顯增強(qiáng)(2064.04±6.78)，到6h達(dá)到高峰(3992.45±16.75)，12h、24h仍呈高表

3、達(dá)(2916.80±6.79，2237.80±7.42)。NS-398干預(yù)后各時(shí)點(diǎn)COX-2 mRNA表達(dá)較膿毒癥組顯著降低，但是仍然高于A組； 2．各時(shí)點(diǎn)IL-6水平在B組改變較A、C組明顯增高(P<0.05)；IL-10水平C組高于A、B組(P<0.05)；C組TNF-α變化與B組相比雖有降低趨勢(shì)，但是無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)； 3．CLP術(shù)后CD4+/CD8+比值下降；相同時(shí)間點(diǎn)比較，CD4/CD8比值C組高于

4、B組(P<0.05)； 4．肝細(xì)胞中NF-кB在A組低表達(dá)，CLP術(shù)后NF-кB表達(dá)增高；相同時(shí)間點(diǎn)比較，C組高于B組(P<0.05)； 5．Pearson相關(guān)分析，COX-2 mRNA與NF-кB呈直線正相關(guān)，r=0.685，P<0.042； 6．B組病理?yè)p傷重，干預(yù)后C組肝臟病理?yè)p傷減輕； 7．CLP術(shù)后B組ALT、AS3、明顯增高，NS-398干預(yù)后相同時(shí)段比較，C組與B組有顯著性差異(P<0.05

5、)。這與COX-2 mRNA變化基本相同。 結(jié)論 1．COX-2選擇性抑制劑NS-398 顯著抑制COX-2的表達(dá)； 2．COX-2在膿毒癥中扮演重要角色，其作用途徑可能是通過(guò)改變促/抗炎細(xì)胞因子之間和CD4+和CD8+T細(xì)胞之間的動(dòng)態(tài)平衡，同時(shí)作用于特異性和非特異性免疫系統(tǒng)，使機(jī)體免疫狀態(tài)更加紊亂，從而影響膿毒癥的肝臟損傷； 3．COX-2選擇性抑制劑NS-398通過(guò)抑制NF-кB的表達(dá)，恢復(fù)促/抗炎細(xì)