鞣花酸對HEK-293細(xì)胞的DNA損傷毒性作用以及可能的氧化應(yīng)激、溶酶體膜通透機(jī)制研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩40頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:
   鞣花酸(Ellagicacid,EA),是廣泛存在于各種具有軟果或堅(jiān)果的植物組織中的一種天然多酚成分。多項(xiàng)研究結(jié)果表明,EA具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、抗細(xì)胞增殖、抗菌和抗病毒等生物學(xué)作用,同時(shí)已有研究報(bào)道EA具有DNA損傷活性。本研究通過觀察EA致HEK-293細(xì)胞DNA損傷,探討EA對DNA損傷可能的毒性機(jī)制(氧化應(yīng)激和溶酶體膜通透),為評(píng)估EA對人類的健康影響提供試驗(yàn)及理論依據(jù)。
   方法:
 

2、  以HEK-293細(xì)胞作為試驗(yàn)系統(tǒng)。通過單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)檢測EA引起體外HEK-293細(xì)胞的DNA損傷,評(píng)價(jià)EA的DNA損傷毒性。為探討其可能的DNA損傷機(jī)制,以2',7'—二氫二氯熒光素(DCFH)和苯二醛(OPT)分別測定細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)以及還原性谷胱甘肽(GSH)水平,以免疫組化方法檢測細(xì)胞內(nèi)8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)的表達(dá)水平,以吖啶橙(AO)和羅丹明123(Rhodamine123)分別測定細(xì)胞內(nèi)溶酶體膜穩(wěn)定

3、性和線粒體膜電位的改變水平,通過N-乙酰半胱氨酸(NAC)干預(yù)試驗(yàn)觀察氧化性損傷對DNA損傷的影響,通過氯化銨(NH4Cl)干預(yù)試驗(yàn)觀察溶酶體膜穩(wěn)定性對DNA損傷的影響,通過地昔帕明(desipramine,酸性神經(jīng)鞘磷脂酶的抑制劑)和抑胃肽(pepstainA,組織蛋白酶D的抑制劑)干預(yù)試驗(yàn)觀察溶酶體內(nèi)酸性水解酶對DNA損傷的影響。試驗(yàn)結(jié)果用SPSSvl1.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
   結(jié)果:
   EA(120μM

4、)作用于HEK-293細(xì)胞1小時(shí)后,引起DNA鏈斷裂,細(xì)胞成彗星樣拖尾,與DMSO空白對照組比其尾長明顯增長,尾DNA%增大;同時(shí),EA(60μM-120μM)作用于HEK-293細(xì)胞3h后,可致細(xì)胞內(nèi)8-OHdG的表達(dá)水平升高;EA(120μM)作用于HEK-293細(xì)胞1小時(shí)后,細(xì)胞內(nèi)ROS生成增加、GSH水平下降;EA(30μM-120μM)作用于HEK-293細(xì)胞1小時(shí)后,細(xì)胞內(nèi)溶酶體膜穩(wěn)定性下降,線粒體膜電位水平變化不明顯。用N

5、H4Cl、NAC、地昔帕明和抑胃肽四種干預(yù)劑預(yù)處理后,EA引起的DNA鏈斷裂、細(xì)胞內(nèi)ROS以及溶酶體膜通透都有明顯地減弱,說明上述四種干預(yù)劑的保護(hù)作用十分顯著。
   結(jié)論:
   高濃度EA能夠引起細(xì)胞DNA損傷,對HEK-293細(xì)胞具有DNA損傷毒性。EA可引起HEK-293細(xì)胞內(nèi)ROS生成增加,細(xì)胞內(nèi)抗氧化物質(zhì)GSH減少,使細(xì)胞處于氧化應(yīng)激狀態(tài),并使HEK-293細(xì)胞內(nèi)氧化性DNA損傷標(biāo)志性產(chǎn)物8-OHdG表達(dá)增強(qiáng)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論