

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:研究黃芪甲苷對H2O2誘導(dǎo)腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用,并進一步探討其分子機制。
方法:
1.建立腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷模型
將培養(yǎng)的人腎小球系膜細胞(HMC)隨機分為6組:正常對照組、H2O2(1×105、2×105、3×105、4×105、5×105nmol?L-1)損傷組,H2O2刺激4h,MTT法檢測細胞活力,測定細胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)的活性。
2.黃芪甲苷對腎
2、小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用
將培養(yǎng)的人腎小球系膜細胞隨機分組:①正常對照組;②H2O2模型組;③黃芪甲苷干預(yù)組:黃芪甲苷6.25、12.5、25、50、100nmol?L-1預(yù)處理24h;④陽性藥對照組包括:分別加入抗氧化劑Tempol(1×105nmol?L-1)和人參皂苷Rg1(3×104nmol?L-1)預(yù)先處理24h。各細胞組處理后,采用MTT法觀察細胞活力;檢測細胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活性、超氧化物岐
3、化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。
3.黃芪甲苷對腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷保護作用的機制
將培養(yǎng)的人腎小球系膜細胞隨機分組:①正常對照組;②H2O2模型組;③黃芪甲苷干預(yù)組:黃芪甲苷12.5、100nmol?L-1預(yù)處理24h;④陽性藥對照組:抗氧化劑Tempol(1×105nmol?L-1)預(yù)先處理24h。各細胞組處理后,采用Hoechst33258染色檢測細胞凋亡;DHE熒光染色檢測胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生;流
4、式細胞術(shù)檢測細胞周期變化情況;Westernblot方法測定細胞周期蛋白CyclinD1、CyclinA及磷酸化p38、T-p38的表達。
結(jié)果:
1.建立腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷模型
檢測結(jié)果顯示:1×105、2×105、3×105、4×105、5×105nmol?L-1H2O2均能誘導(dǎo)腎小球系膜細胞發(fā)生氧化應(yīng)激損傷,細胞存活率明顯降低,細胞活力與H2O2濃度及其作用的時間呈正相關(guān)下降趨勢;細胞培養(yǎng)液中
5、乳酸脫氫酶(LDH)活性升高,且隨著H2O2濃度的增加,培養(yǎng)液中LDH活性有升高的趨勢。
2.黃芪甲苷對腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用
黃芪甲苷及陽性藥組均能夠減輕H2O2(3×105nmol·L-1)誘導(dǎo)的腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷。實驗結(jié)果顯示:與模型組比較,用藥組細胞存活率及細胞活力明顯升高,細胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活性下降、超氧化物岐化酶(SOD)活性升高,丙二醛(MDA)含量降低。
6、3.黃芪甲苷對腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷保護作用的機制
結(jié)果顯示:100nmol·L-1黃芪甲苷能夠顯著減輕H2O2(3×105nmol·L-1)誘導(dǎo)的腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷;抑制細胞凋亡,降低胞內(nèi)ROS產(chǎn)量;調(diào)節(jié)細胞周期蛋白CyclinD1表達、各細胞周期的百分比及細胞正常增值;降低磷酸化P38的表達等有關(guān)。
結(jié)論:
1.H2O2體外誘導(dǎo)腎小球系膜細胞氧化損傷模型的建立最佳條件:3×105nmol?L
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 黃芪甲苷對高糖環(huán)境下人腎小球系膜細胞損傷保護作用及其機制研究.pdf
- 黃芪甲苷對高糖誘導(dǎo)人腎小球系膜細胞損傷的保護作用及其機制研究.pdf
- 人參皂苷Rg3對腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用及機制研究.pdf
- 黃芪甲苷對高胰島素誘導(dǎo)人腎小球系膜細胞損傷的保護作用及機制研究.pdf
- 二甲雙胍對大鼠腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激的影響
- 二甲雙胍對大鼠腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激的影響.pdf
- 高糖誘導(dǎo)的腎小球系膜細胞內(nèi)氧化應(yīng)激對MnSOD的影響及其機制.pdf
- 黃芪甲苷對高糖所致人腎小球系膜細胞損傷的保護作用及其調(diào)控NADPH氧化酶-ROS-Akt-NF-κB信號通路的機制研究.pdf
- 黃芪甲苷的抗氧化應(yīng)激作用對體外高糖刺激足細胞的保護作用.pdf
- 楊梅花色苷對胰島細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用及其機制探討.pdf
- 絞股藍皂苷對AGEs誘導(dǎo)下人腎小球系膜細胞RAGE表達及氧化應(yīng)激水平的影響.pdf
- Maresin1對高糖損傷腎小球系膜細胞的保護作用及機制.pdf
- 黃芪甲苷對PC12細胞OGD-R損傷的保護作用及其作用機制研究.pdf
- 黃芪甲苷抗PC12細胞氧化損傷作用機制研究.pdf
- 靈芝對大鼠腎小球系膜細胞保護作用的研究.pdf
- 醛固酮對腎小球系膜細胞自噬的作用及機制研究.pdf
- 胰高血糖素樣肽-1對高糖培養(yǎng)腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激的影響.pdf
- 波動性高糖及α-硫辛酸對大鼠腎小球系膜細胞氧化應(yīng)激的影響.pdf
- 金絲桃苷對Nrf2-ARE途徑的影響及其對肝細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用.pdf
- 高熱預(yù)處理對PC12細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用及其機制研究.pdf
評論
0/150
提交評論