呋喃丹的法醫(yī)毒物動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　 1．建立呋喃丹的死后分布、保存檢材和埋葬尸體（犬）中的分解動(dòng)力學(xué)研究動(dòng)物模型；
　　 2．研究呋喃丹在大鼠、犬體內(nèi)的死后分布以及其在保存檢材、埋葬尸體（犬）中的分解動(dòng)力學(xué)規(guī)律，為呋喃丹中毒（死）案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 1．死后分布
　　 雄性大鼠12只，隨機(jī)分為2組。經(jīng)灌胃分別勻速注入2LD50（22 mg/kg）和4LD50（44mg/kg）呋喃丹。待呼

2、吸和心跳全部消失時(shí)，迅速解剖動(dòng)物，取心血、心、肝、脾、肺、腎、腦冷凍保存，待檢。GC/MS 法定性，GC 法定量檢測(cè)其中呋喃丹含量。健康犬9只，隨機(jī)分為3組，4LD50（13.50mg/kg）呋喃丹灌胃，觀察動(dòng)物反應(yīng)。3組動(dòng)物分別于死亡當(dāng)時(shí)、室溫放置1d、7d 解剖取心、肝、脾、肺、腎、腦、右前肢肌、右后肢肌、胸肌、胃組織、心血、膽汁、玻璃體液。酸性二氯甲烷提取，GC/MS 法定性定量檢測(cè)其中呋喃丹、呋喃酚含量。
　　 2．保存

3、檢材中的分解動(dòng)力學(xué)
　　 2.1染毒犬血、肝中呋喃丹分解動(dòng)力學(xué)：健康犬6只， 4LD50（13.50mg/kg）呋喃丹灌胃，觀察動(dòng)物反應(yīng)。待心跳、呼吸、脈搏消失后，立即解剖，取其心血和肝。每只犬心血和肝分三等份，分別置于20℃、4℃、-20℃保存。分別于0h、1d、2 d、3 d、4 d、7 d GC/MS法定性，GC 法定量檢測(cè)其中呋喃丹含量。健康犬3只，4LD50（13.50mg/kg）呋喃丹灌胃，觀察動(dòng)物反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)犬心跳、

4、呼吸、脈搏消失后，立即解剖，取其心血和肝。心血中加氟化鈉至1％，肝臟加4％甲醛溶液固定，20℃保存。分別于0h、2d、4d、7d GC/MS 法定性，GC 法定量檢測(cè)其中呋喃丹含量。
　　 2.2 尸血中添加呋喃丹的分解動(dòng)力學(xué)：尸血1000mL，添加80mg 呋喃丹，分為四等份，其中三份分別置于20℃、4℃、-70℃保存；另一份添加1％的氟化鈉。分別于0h、2d、5d、8d、32d、64d、96d、152d 提取檢材， GC/M

5、S 法定性定量檢測(cè)呋喃丹和呋喃酚。
　　 3．埋葬尸體中的分解動(dòng)力學(xué)
　　 3.1埋葬尸體中呋喃丹分解動(dòng)力學(xué)：健康犬12只，4LD50劑量呋喃丹灌胃染毒。待心跳、呼吸、脈搏消失后，裝入塑料袋，不封口，埋于太原市東山實(shí)驗(yàn)基地。分別于14d、40d、62d、153d 挖出后，解剖，取材， GC/MS 法定性定量檢測(cè)呋喃丹和呋喃酚。
　　 3.2 埋葬方式對(duì)呋喃丹在埋葬尸體中分解動(dòng)力學(xué)的影響：健康犬9只，4LD50劑量

6、呋喃丹灌胃染毒。待心跳、呼吸、脈搏消失后，隨機(jī)分成3組，分別裝入塑料袋、編織袋和木箱（棺材）中埋于實(shí)驗(yàn)基地，62d后挖出解剖取材， GC/MS 法定性定量檢測(cè)呋喃丹和呋喃酚。
　　 3.3 染毒劑量對(duì)呋喃丹在埋葬尸體中分解動(dòng)力學(xué)的影響：健康犬12只，隨機(jī)分為4組，分別以LD50、2LD50、4LD50、8LD50灌胃染毒。待心跳、呼吸、脈搏消失后，分別裝入塑料袋中，埋于實(shí)驗(yàn)基地，62d后挖出，解剖，取材， GC/MS 法定性定量

7、檢測(cè)呋喃丹和呋喃酚。
　　 結(jié)果:
　　 1．動(dòng)物表現(xiàn)
　　 實(shí)驗(yàn)組大鼠在經(jīng)口灌胃后出現(xiàn)中毒癥狀，染毒10±30min內(nèi)實(shí)驗(yàn)大鼠死亡，臨床表現(xiàn)與有機(jī)磷農(nóng)藥中毒相似，即抽搐、流涎、流淚、濕毛、大小便失禁，然后死亡。實(shí)驗(yàn)犬染毒0.25±0.10h 出現(xiàn)癥狀，于1.0±0.5h 死亡，中毒癥狀表現(xiàn)為：流涎、反胃、口吐白沫、大小便失禁、肌束震顫、抽搐。
　　 2．GC和GC/MS 檢測(cè)
　　 3．死后分布

8、
　　 3.1呋喃丹在大鼠體內(nèi)死后分布
　　 各組織臟器呋喃丹含量由高到低分別為（LSD-t 檢驗(yàn)，P<0.05）：（1）2LD50組：肺、肝>心血、腦、心、腎、脾；（2）4LD50組：肺、肝、腎>心血、心、心血、腦、脾。呋喃丹在含血豐富的器官如肺、肝中含量較其它組織和血液高，脾臟中含量最低。4LD50組各臟器呋喃丹的含量普遍比2LD50組中各臟器呋喃丹的含量低。
　　 3.2 呋喃丹在犬體內(nèi)死后分布及在尸體中的

9、穩(wěn)定性
　　 死亡當(dāng)時(shí)，各臟器組織中呋喃丹含量由高到低分別為：胃＞心血、肝、肺＞脾、心、右前肢肌、腎、玻璃體液、腦＞胸肌、右后肢肌、膽汁（LSD-t 檢驗(yàn)，P<0.05）。呋喃酚在各臟器組織中的含量從高到低依次為：胃＞肝＞心血、心＞腎、脾，其余臟器均未檢出。室溫放置1d、7d后，心血、心、肝、脾、肺、腎、胃中呋喃丹含量較死亡當(dāng)時(shí)未見(jiàn)明顯減少（t 檢驗(yàn)P＜0.05），玻璃體液、肌肉、腦中未檢出呋喃丹。隨放置時(shí)間延長(zhǎng)死亡當(dāng)時(shí)未檢出呋

10、喃酚的膽汁、肺組織中可檢出呋喃酚，死亡當(dāng)時(shí)檢出呋喃酚的胃、肝、心血、心、腎、脾中呋喃酚含量呈升高趨勢(shì)。
　　 4．保存檢材中的分解動(dòng)力學(xué)
　　 4.1染毒致死犬（血、肝）呋喃丹的分解動(dòng)力學(xué)：不同條件保存血和肝中呋喃丹含量均呈下降趨勢(shì)。保存第7d，不同溫度條件下血中均檢測(cè)不出呋喃丹，常溫下肝臟中也未檢測(cè)出呋喃丹。在不同溫度條件下，-20℃保存犬血、肝呋喃丹含量相對(duì)20℃、4℃下降慢（t 檢驗(yàn)，P＜0.05）。20℃和20℃

11、（1％NaF）保存條件下血中呋喃丹含量在2d分別下降至最初濃度的63.9％和49.5％，4d，分別下降至最初濃度的29.5％和14.8％。20℃和20℃（4％甲醛）保存條件下，肝中呋喃丹含量在2d分別下降至最初濃度的31.5％和45.7％，4d，分別下降至最初濃度的2.8％和18.2％，7d，分別下降至最初濃度的0％（未檢出）和7.4％。4.2 保存尸體血中呋喃丹的分解動(dòng)力學(xué)：不同保存條件下尸體血中添加呋喃丹含量均呈下降趨勢(shì)，20℃、4

12、℃、-70℃和20℃（1％NaF）條件下分別于2d、2d、5d、2d 顯著下降至最初濃度的79.7％、72.6％、82.1％、79.5％，于152 d，分別下降至最初濃度的22.9％、39.0％、62.3％、0％（未檢出），呋喃丹的分解符一室開(kāi)放模型一級(jí)速率過(guò)程，可用CT=C0e-KeT表示，其分解半衰期分別為61.4d、135.3d、190.9d和150.3d。0h，添加呋喃丹尸體血中即可檢測(cè)出呋喃酚，且呋喃酚含量隨時(shí)間呈增加趨勢(shì)（t

13、 檢驗(yàn)，P＜0.05），20℃、4℃、-70℃和20℃（1％ NaF）條件下，0h 呋喃酚含量2.06±0.39μg/Ml，152d，分別增加到26.97±4.28μg/Ml、25.47±8.88μg/Ml、18.49±4.84μg/Ml、15.99±3.00μg/Ml。
　　 5．埋葬尸體的分解動(dòng)力學(xué)
　　 埋葬0d、14d、40d、62d，153d 呋喃丹含量呈先升高后下降趨勢(shì)，除右前肢肌肉和胃外，其余臟器呋喃丹含量

14、均在14d 升至最高。埋葬后40d，右后肢肌肉、胸肌、肺、腦中未檢測(cè)出呋喃丹。62d，右前肢肌肉、右后肢肌肉、胸肌、肝、肺、腦中未檢測(cè)出呋喃丹。153d，只有胃中可檢出呋喃丹及呋喃酚。0h，心血、心、肝、脾、腎、胃中均檢出呋喃酚，且呋喃酚含量隨時(shí)間呈增加趨勢(shì)。40d時(shí)，在未檢出呋喃丹的心血中檢測(cè)出呋喃酚。62d時(shí)，在未檢出呋喃丹的右前肢肌肉和肝中檢出了呋喃酚。不同埋葬方式研究顯示，埋葬62d時(shí)，塑料袋埋葬方式下，心、脾、腎、胃中可檢出呋

15、喃丹，而編織袋條件下腎、胃中可檢出，木箱（棺材）條件下只有胃可檢出。塑料袋和編織袋條件下心、肝、脾、腎、胃可檢出呋喃酚，木箱（棺材）條件下心、肝、脾、胃可檢出呋喃酚。不同染毒劑量的研究結(jié)果顯示，埋葬62d時(shí)，1LD50和2LD50劑量組各臟器中均未檢出呋喃丹、呋喃酚。4LD50劑量組心、脾、腎、胃中檢測(cè)出呋喃丹，右前肢肌肉、心、肝、脾、腎、胃中檢出了呋喃酚。8LD50劑量組右后肢肌肉、心、肝、脾、肺、腎、胃中檢測(cè)到呋喃丹，右前肢肌肉、右

16、后肢肌肉、心、肝、脾、肺、腎、腦、胃中檢測(cè)出呋喃酚。
　　 結(jié)論:
　　 1．本實(shí)驗(yàn)采用不同劑量呋喃丹灌胃染毒，建立了呋喃丹的死后分布、保存檢材和埋葬尸體中的分解動(dòng)力學(xué)動(dòng)物（研究）模型，可應(yīng)用于呋喃丹中毒（死）的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和法醫(yī)毒物動(dòng)力學(xué)研究。
　　 2．本研究建立了生物檢材中呋喃丹的提取和GC-NPD、GC/MS 檢測(cè)方法，提取回收率、線性范圍、檢測(cè)靈敏度均達(dá)生物檢材中毒（藥）物檢驗(yàn)要求，可應(yīng)用于呋喃丹中毒（死

17、）案件的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和法醫(yī)毒物動(dòng)力學(xué)研究。
　　 3．染毒致死大鼠體內(nèi)呋喃丹含量由高到低分別為（LSD-t檢驗(yàn)，P<0.05）：（1）2LD50組：肺、肝>心血、腦、心、腎、脾；（2）4LD50組：肺、肝、腎>心血、心、心血、腦、脾。提示，在實(shí)際中毒案件的法醫(yī)鑒定中應(yīng)合理取材，全面分析，以保證鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確。染毒致死犬死亡當(dāng)時(shí)尸體內(nèi)呋喃丹含量由高到低分別為：胃＞心血、肝、肺＞脾、心、右前肢肌、腎、玻璃體液、腦＞胸肌、右后肢肌、膽汁

18、（LSD-t檢驗(yàn)，P<0.05）。呋喃丹的代謝產(chǎn)物呋喃酚在各臟器組織的含量從高到低依次為：胃＞肝＞心血、心＞腎、脾，其余
　　 臟器均未檢出。室溫放置7d，體內(nèi)仍可檢出呋喃丹和呋喃酚。提示呋喃丹在體內(nèi)代謝較快，但在尸體內(nèi)有一定的穩(wěn)定性。呋喃丹中毒死亡案件采取檢材時(shí)，可提取膽汁、肺、胃、脾、肝，不適宜提取玻璃體液、肌肉、腦，并應(yīng)當(dāng)同時(shí)檢測(cè)呋喃丹和呋喃酚含量，為死因判定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 4．不同條件保存時(shí)，染毒犬血、肝中

19、呋喃丹及尸體血中添加呋喃丹均可發(fā)生分解。保存犬血、肝中呋喃丹分解較快，第7d，不同溫度條件下血中均檢測(cè)不到呋喃丹，常溫下肝臟中也未檢測(cè)出呋喃丹。而尸體血添加呋喃丹分解相對(duì)較慢，20℃、4℃、-70℃、20℃（加NaF 至1％）保存條件下呋喃丹的分解半衰期分別為61.4d、135.3d、190.9d、150.3d。呋喃丹中毒法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中應(yīng)注意低溫保存檢材，并同時(shí)檢測(cè)呋喃丹和呋喃酚。
　　 5． 呋喃丹在保存尸體血中的分解可用一室開(kāi)

20、放模型一級(jí)速率過(guò)程描述， 可用CT=C0e-KeT表示，根據(jù)此方程計(jì)算的理論值與實(shí)測(cè)值符合情況良好。可用尸體血中呋喃丹分解動(dòng)力學(xué)方程和參數(shù)推測(cè)采取檢材當(dāng)時(shí)的血中呋喃丹濃度。
　　 6．呋喃丹在埋葬尸體中可發(fā)生分解，分解較快。埋葬153d后，只有胃中可檢出呋喃丹及呋喃酚。埋葬153d內(nèi)，除右前肢肌肉和胃外，其余臟器呋喃丹含量呈先升高后下降趨勢(shì)， 14d時(shí)最高。不同埋葬方式以及不同染毒劑量對(duì)其分解影響較大。在進(jìn)行呋喃丹中毒（死）埋葬