不同發(fā)酵時(shí)期酸馬奶中乳清蛋白的分離及差異蛋白的初步研究.pdf

1、酸馬奶是以鮮馬奶為原料，經(jīng)乳酸菌、酵母菌等微生物的作用下生成的低酒精含量的乳飲料。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)及生物化學(xué)分離技術(shù)的不斷發(fā)展和蒙醫(yī)學(xué)理論的逐漸完善，研究者認(rèn)識(shí)到酸馬奶微生物及其營(yíng)養(yǎng)成分具有很高的益生作用。近幾年，人們發(fā)現(xiàn)酸馬奶中酪蛋白和乳清蛋白的含量比例(1∶1)很適合機(jī)體的消化和吸收。但是，人們很少關(guān)注酸馬奶乳蛋白在不同發(fā)酵階段中的變化?；谝陨锨闆r，本研究以酸馬奶乳清蛋白為研究對(duì)象，采用SDS-PAGE電泳方法，并結(jié)合Image

2、-Lab凝膠分析軟件得到了以下結(jié)果:
　　1.為了找出適合分離酸馬奶乳清蛋白質(zhì)的SDS電泳體系，對(duì)分離膠濃度、濃縮膠濃度、分離膠電壓、上樣體積、染色方法、上樣濃度等方面進(jìn)行電泳條件的優(yōu)化。結(jié)果顯示，分離膠濃度為12％、濃縮膠濃度為5％、分離膠電壓為180V、上樣體積為16ul、染脫色法為改良考馬斯亮藍(lán)染色法時(shí)，能夠很好地分離酸馬奶乳清蛋白各組分，而且通過SDS-PAGE方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)，該體系具有很高的精確度，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)

3、小于3％。
　　2.在確定SDS電泳條件以及調(diào)節(jié)上樣濃度為0.5ug/ul的基礎(chǔ)上，通過建立低分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白曲線和利用Image-Lab凝膠軟件分別測(cè)定和分析了酸馬奶乳清蛋白分子量和不同發(fā)酵時(shí)期乳清蛋白的差異變化結(jié)果如下:
　　(1)本研究根據(jù)不同發(fā)酵時(shí)期酸馬奶乳清蛋白電泳圖及通過建立低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到的分子量范圍為1.033×104-6.720×104 Da，共分離出13條蛋白區(qū)帶。共有的蛋白條帶有5條，8條差異蛋