產(chǎn)α-糖苷酶抑制劑鏈霉菌株P(guān)W609的篩選及活性成分分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、α-糖苷酶抑制劑可以直接延緩人體腸道中淀粉的消化和吸收，從而降低餐后高血糖，是目前最安全有效的降糖藥物之一，研發(fā)療效好、副作用小且作用靶點明確的α-糖苷酶抑制劑類藥物一直是口服降糖藥物研發(fā)的熱點。鏈霉菌是種類和數(shù)量龐大的一個微生物類群，具有強大的生物合成能力，一直以來都是人們篩選新型天然化合物的資源寶庫。
　　本研究以參與淀粉降解的關(guān)鍵酶——重組人小腸麥芽糖苷酶C端催化亞基(CtMGAM)為靶標(biāo)蛋白，對71株鏈霉菌的發(fā)酵產(chǎn)物進行篩

2、選。通過測定半抑制濃度IC50的數(shù)值，來比較它們對CtMGAM的抑制作用，最終確定了IC50值最小的PW609菌株作為后續(xù)研究菌株。
　　根據(jù)對菌株P(guān)W609進行的形態(tài)學(xué)特征和生理生化特征實驗，以及16S rDNA序列和系統(tǒng)進化分析，它的分類地位被初步鑒定為鏈霉菌屬淀粉酶鏈霉菌（Streptomyces diastaticus），將其16S rDNA序列提交GenBank，登記號為GQ985448。
　　對PW609菌株進行

3、10-L搖瓶發(fā)酵，發(fā)酵液通過中空纖維膜超濾、乙醇沉淀、離子交換和大孔吸附樹脂以及半制備液相，可以得到α-麥芽糖苷酶抑制劑混合物SE609-Ⅳ。在分離純化過程中，隨著雜質(zhì)的減少，其對應(yīng)的半抑制濃度也在減小，達到了分離純化的目的，最后獲得的SE609-Ⅳ回收率0.33％，IC50=0.001823mg/mL。
　　將SE609-Ⅳ與市售的3種α-糖苷酶抑制劑類降糖藥物進行對比，發(fā)現(xiàn)其抑制作用比阿卡波糖弱5.20倍，但比同樣劑量的伏格列

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