桑葉和仙鶴草α-葡萄糖苷酶抑制劑的分離及性質(zhì)研究.pdf

1、糖尿病是一種嚴(yán)重威脅人類健康的代謝性、終身性疾病。目前的糖尿病治療藥物均有不同程度的副作用，如導(dǎo)致低血糖、乳酸性酸中毒等，并且無法根本阻止胰島細(xì)胞的進(jìn)一步壞死，往往導(dǎo)致胰島素依賴。 桑葉和仙鶴草是中醫(yī)預(yù)防和治療糖尿病的傳統(tǒng)中藥，現(xiàn)代藥理研究也證實(shí)，桑葉和仙鶴草的水提或醇提物具有防治高血糖及糖尿病的良好作用。但是，目前對桑葉和仙鶴草中α-葡萄糖苷酶抑制成分的研究停留在中藥的有效部位，如總黃酮、總生物堿、總多糖等，有的直接就是榨出液

2、或水提物、醇提物等，完全沒有涉及到抑制α-葡萄糖苷酶的有效化學(xué)成分。而中藥有效成分的研究是實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵，也是開發(fā)具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)創(chuàng)新藥物的主要源泉。 搞清楚中藥藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，有利于研究治療藥物的作用機(jī)理，也有利于發(fā)現(xiàn)先導(dǎo)化合物并通過結(jié)構(gòu)修飾等，尋找活性更高、毒性更低的新化合物，從而發(fā)展創(chuàng)新藥物，這是目前藥學(xué)科學(xué)中的研究熱點(diǎn)之一。 因此，本課題采用α-葡萄糖苷酶抑制活性指導(dǎo)下的導(dǎo)向分離方法(bioacti

3、vity—guided isolation)，結(jié)合現(xiàn)代分離、分析、檢測技術(shù)，在本實(shí)驗室以及國內(nèi)外對桑葉和仙鶴草具有顯著α-葡萄糖苷酶抑制活性的大量實(shí)驗研究事實(shí)的基礎(chǔ)上，分離提取桑葉和仙鶴草中抑制α-葡萄糖苷酶的有效成分單體，并進(jìn)一步研究其酶學(xué)活性和體內(nèi)降血糖活性，從而為新一代抗糖尿病藥物的開發(fā)奠定堅實(shí)的基礎(chǔ)。通過篩選，從中藥桑葉和仙鶴草中獲得了α-葡萄糖苷酶抑制劑。本文重點(diǎn)探討抑制劑的分離提取工藝及其化學(xué)、酶學(xué)性質(zhì)。 采取的主要

4、工藝路線：桑葉和仙鶴草分別用70％7,醇冷浸，得乙醇浸膏、再依次用石油醚和乙酸乙酯萃取，其中乙酸乙酯相經(jīng)硅膠柱色譜進(jìn)一步純化，分別得到桑葉抑制劑：SY5-2、SY7-1、SY8-2和仙鶴草抑制劑：XHCl-2、XHCl-4、XHCl-7。 借助化學(xué)方法定性分析及紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜及核磁共振譜四大波譜分析，確定桑葉SY5-2為單體化合物6，9-二烯二十碳烷，這是在桑葉中第一次發(fā)現(xiàn)該化合物，也是新發(fā)現(xiàn)的一個α-葡萄糖苷酶抑制劑

5、；確定仙鶴草的XHCl-2和XHCl-4分別為單體化合物槲皮素和仙鶴草內(nèi)酯-6-O-β-D-葡萄吡喃糖苷，槲皮素是第一次在仙鶴草中被發(fā)現(xiàn)，這兩個化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性也是首次被發(fā)現(xiàn)。 桑葉抑制劑SY5-2、SV7-1、SY8-2和仙鶴草抑制劑：XHCl-2、XHCl-4、XHCl-7在醇中的溶解性均很好，在20～100℃的溫度范圍和pH3～12的環(huán)境中有較好的穩(wěn)定性。與市售拜糖蘋比較發(fā)現(xiàn)，它們不僅對α-葡萄糖苷酶的抑制活