產(chǎn)幾丁質(zhì)酶木霉菌菌株篩選及特性的研究.pdf

1、采集云南省玉溪、文山、大理、麗江、楚雄、遵義等6市土樣49份,分離純化木霉菌,獲得118個菌株.對稀釋平板法、直接稀釋法、誘捕法進行了比較,結(jié)果表明直接稀釋法和誘捕法分離木霉菌的效果較好,誘捕法的效果最好,易于獲得目的菌株.與稀釋平板法比較,直接稀釋法和誘捕法尤其適用于處理大批量的土樣.首次采用還原糖法測定木霉菌產(chǎn)幾丁質(zhì)酶特性.在以幾丁質(zhì)酶的底物--幾丁質(zhì)(膠狀幾丁質(zhì))為唯一碳源的液體培養(yǎng)基中進行木霉菌發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵上清液與膠態(tài)幾丁質(zhì)3

2、7℃保溫30min后與3,5-二硝基水楊酸試劑在100℃水浴中反應(yīng),以反應(yīng)后顏色的變化,確定發(fā)酵液中幾丁質(zhì)酶的有無及數(shù)量.與常規(guī)采用的透明圈法相比,還原糖法較為直觀、準確.應(yīng)用還原糖法進行產(chǎn)幾丁質(zhì)酶木霉菌的篩選,關(guān)鍵在于發(fā)酵上清液中沒有還原糖,即所有發(fā)酵上清液與DNS反應(yīng)都沒有顏色變化;這樣只需比較發(fā)酵上清液和膠態(tài)幾丁質(zhì)混合保溫后與DNS反應(yīng)顏色的變化,即可確定發(fā)酵上清液中有無幾丁質(zhì)酶存在,辨別反應(yīng)顏色的變化,比在半透明平板上辨別透明圈