血樣中痕量藥物檢測用快速樣品前處理和分析體系的構(gòu)建.pdf

1、隨著藥物研發(fā)和醫(yī)學(xué)檢測技術(shù)的發(fā)展，血液樣品中痕量藥物的檢測成為主要的研究內(nèi)容。液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)由于具有極高的靈敏度，被廣泛地應(yīng)用于這一領(lǐng)域。但是它所使用的質(zhì)譜檢測器比較精密，易受到血樣基質(zhì)的干擾，所以需要使用凈化效果好的快速前處理和色譜分離技術(shù)與之配套，以改善檢測結(jié)果，同時(shí)提高儀器使用效率，減輕儀器所受生物基質(zhì)的污染，從而降低儀器的使用和維護(hù)成本。
　　本論文研究了一種用于液質(zhì)聯(lián)用檢測血樣中痕量藥物的快速樣品前處理和快速色譜分離的技術(shù)

2、體系。它采用了丙烯酸接枝改性的聚砜中空纖維膜對(duì)血液樣品進(jìn)行快速離心過濾，然后利用基于殼層硅膠的C18反相限進(jìn)介質(zhì)材料色譜柱進(jìn)行快速色譜分析。該體系有效地去除了血樣中的蛋白質(zhì)和磷脂，提高了液質(zhì)聯(lián)用檢測血樣中痕量物質(zhì)的回收率、靈敏度、準(zhǔn)確性、精確度和效率。由于其使用方式簡單、速度快，降低了血樣中痕量藥物檢測的成本，可廣泛地應(yīng)用于臨床檢測和藥物代謝研究領(lǐng)域。
　　首先以高能輻射的方式對(duì)聚砜中空纖維膜進(jìn)行接枝改性。通過優(yōu)化接枝工藝，以丙烯

3、酸為單體接枝得到具有合適截留能力的聚砜中空纖維膜，其具有良好的物理截留蛋白質(zhì)和化學(xué)吸附磷脂的能力。以它制得中空纖維膜離心組件，應(yīng)用于血漿樣品中痕量藥物檢測時(shí)的樣品前處理，通過條件優(yōu)化和其他方法的對(duì)比，結(jié)果表明該前處理技術(shù)具有回收率高、凈化效果好、速度快、使用方便等特點(diǎn)。
　　其次，本研究研制了2.7μm的殼層硅膠，并以其鍵合了一種限進(jìn)介質(zhì)C18反相色譜填料。使用它裝填的液相色譜柱可以用高流速的流動(dòng)相進(jìn)行快速高效的色譜分離，提高了液

4、質(zhì)聯(lián)用儀的使用效率。它具有排阻蛋白質(zhì)的能力，使之在死時(shí)間出峰，避免了對(duì)痕量目標(biāo)藥物的干擾;而且其固定相具有疏水親水的兩性性質(zhì)，增加了磷脂的色譜保留，避免磷脂對(duì)保留稍弱的痕量目標(biāo)藥物的干擾。它耐受血樣中生物基質(zhì)，相比于普通的C18色譜柱具有較長的使用壽命。
　　96孔板式的丙烯酸接枝聚砜中空纖維膜離心組件和殼層硅膠鍵合C18反相限進(jìn)介質(zhì)色譜柱相結(jié)合，為血樣中痕量藥物的液質(zhì)聯(lián)用檢測提供了消除基質(zhì)干擾的方案。通過對(duì)實(shí)際血樣中模型藥物進(jìn)行