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1、在惡性腫瘤的化療過(guò)程中,化療藥物缺乏對(duì)腫瘤的選擇性,并且存在嚴(yán)重的副作用,降低了治療效果。然而納米藥物載體能夠改變藥物的體內(nèi)分布,對(duì)腫瘤組織具有靶向性,可延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間,降低毒副作用,在腫瘤的治療領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。
本文將亞油酸(Linoleic acid)通過(guò)酯化反應(yīng)偶聯(lián)到普魯蘭多糖(Pullulan)長(zhǎng)鏈上,獲得兩親性聚合物PULA1、PULA2和PULA3。通過(guò)傅里葉變換紅外光譜(FTIR)和核磁共振氫譜(1H
2、 NMR)對(duì)聚合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征,采用透析法制備自組裝納米膠束PULA,芘熒光探針?lè)y(cè)得納米膠束PULA1、PULA2和PULA3的臨界膠束濃度(CMC)分別為70,62和50μg/mL,動(dòng)態(tài)光散射(DLS)及透射電鏡(TEM)結(jié)果顯示納米膠束PULA呈球形且均勻分布,粒徑在80.1~156.8 nm之間,體外溶血實(shí)驗(yàn)表明該納米膠束具有低溶血率,表現(xiàn)出良好的生物相容性。
以抗癌藥物阿霉素(DOX)為模型藥物,通過(guò)透析法制備
3、了載藥納米膠束PULA/DOX,納米膠束PULA3/DOX的載藥量和包封率分別達(dá)8.05%和88.6%。載藥納米膠束PULA/DOX在pH=7.4的磷酸緩沖液(PBS)中持續(xù)釋放DOX達(dá)96 h以上,DOX的累積釋放量在43%~55%之間,并且DOX的釋放速率隨釋放介質(zhì)pH的降低逐漸加快,該納米膠束的pH敏感性有利于提高DOX在腫瘤組織的累積釋放量。
通過(guò)熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測(cè)MCF-7和SMMC-7721細(xì)胞對(duì)納米膠束P
4、ULA的攝取情況,結(jié)果表明納米膠束PULA能夠攜帶大量的DOX進(jìn)入細(xì)胞;抑制劑處理后的細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)表明PULA納米膠束主要通過(guò)耗能的、肌動(dòng)蛋白聚合介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞;納米膠束PULA2/DOX對(duì)細(xì)胞周期影響的結(jié)果顯示該載藥納米膠束主要將MCF-7和SMMC-7721細(xì)胞阻滯在S期,并且致使部分細(xì)胞出現(xiàn)凋亡;納米膠束PULA進(jìn)入細(xì)胞后的傳遞途徑及分布結(jié)果表明納米膠束PULA攜帶DOX經(jīng)過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞后,傳遞到溶酶體中,在溶酶體內(nèi)釋
5、放出來(lái)的DOX逐步遷移到細(xì)胞核發(fā)揮抗癌效果;細(xì)胞毒性試驗(yàn)表明空白納米膠束對(duì)Raw264.7和HEK293正常細(xì)胞均沒(méi)有毒性,載藥納米膠束PULA/DOX對(duì)MCF-7和SMMC-7721細(xì)胞的毒性呈現(xiàn)時(shí)間和濃度依賴(lài)性;PULA2/DOX納米膠束的體內(nèi)藥物代謝結(jié)果表明PULA納米膠束能夠延長(zhǎng)DOX在血液中的保留時(shí)間,維持血液中DOX的含量在較高濃度。
綜上所述,PULA納米膠束是一種新型的具有良好生物相容性的載體材料,有望在癌癥治
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