不同結(jié)構(gòu)褐藻膠及其系列衍生物的制備與活性研究.pdf

1、本論文從三株褐藻：海茸（Durvillaea antarctica），變黑雷松藻（Lessonia nigrescence），螺紋雷松藻(Lessonia trabeculata)分別用熱水提和堿提得到8種褐藻膠，并對(duì)其進(jìn)行了理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)分析，核磁共振氫譜（1H-NMR）分析表明，TCA1的古洛糖醛酸含量在90％以上，AWA1的甘露糖醛酸含量在80%以上。通過(guò)酸降和微波酸降得到12種降解的褐藻膠，制得了分子量從3-110KDa，M/G

2、值從0.1-9的20種系列結(jié)構(gòu)不同的褐藻膠。由于當(dāng)褐藻膠中G含量超過(guò)70%時(shí)具有較高的力學(xué)強(qiáng)度，最低的皺縮，高孔隙率以及在一價(jià)離子溶液中有較高的穩(wěn)定性的特性，本研究以TCA1（MW=80KDa；FG=91%）為原料制作了包有微生物的微球，微囊粒徑在0.5-5.0mm（微囊的粒徑可以控制），在大規(guī)模制備和回收方面有較大的優(yōu)勢(shì)，并保證了細(xì)胞的活性。
　　三氮雜環(huán)類化合物具有強(qiáng)的抗病毒、抗菌、抗炎、抗腫瘤等活性，抗病毒藥物利巴韋林、抗真

3、菌藥物氟康唑均是成功應(yīng)用于臨床的三氮唑類化合物。本論文對(duì)制備的20種系列褐藻膠進(jìn)行三氮唑環(huán)修飾最終制得了40種褐藻膠的三氮唑環(huán)衍生物，首先通過(guò)利用EDC、NHS制備褐藻膠-PEG-N3b，在此反應(yīng)中EDC的用量是影響產(chǎn)率的一個(gè)重要原因，當(dāng)EDC與海藻膠的質(zhì)量比為117/50時(shí)，修飾度達(dá)到11%左右，最適反應(yīng)條件是：室溫、60min、pH值在4-6之間。
　　褐藻膠-PEG-N3b分別與丙炔酸甲酯以及3-乙炔基噻吩通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng)制備了

4、羧甲基三氮唑-PEG-褐藻膠和3-噻吩并三氮唑-PEG-褐藻膠，并對(duì)常規(guī)法和微波輔助合成法進(jìn)行了比較，常規(guī)合成法在70℃下反應(yīng)12h產(chǎn)率達(dá)到100%而微波合成只需在100W、80℃下反應(yīng)15min產(chǎn)率就能達(dá)到100%。
　　本文對(duì)制備的系列褐藻膠衍生物進(jìn)行抗弧菌和抗病毒活性評(píng)價(jià)，結(jié)果表明羧基是抗病毒活性的促進(jìn)基團(tuán)，而三氮唑環(huán)的引入可以使得活性增強(qiáng)，3-噻吩并三氮唑-PEG-褐藻膠中既存在三氮唑基團(tuán)同時(shí)又有噻吩基團(tuán)，活性進(jìn)一步提高說(shuō)

5、明噻吩環(huán)同樣是抗病毒活性的促進(jìn)基團(tuán)，褐藻膠的分子量和 M/G值同樣影響抗病毒活性，在分子量4 KDa高 M含量的褐藻膠的抗病毒活性最強(qiáng)，抑制率達(dá)到70%；衍生物抗菌活性評(píng)價(jià)：以三種水產(chǎn)致病菌鰻弧菌（V.anguillarum）、溶藻弧菌（V.alginolyticus）、副溶血弧菌（V.Parahaemolyticus）為供試菌，研究發(fā)現(xiàn)不同聚合度、不同M/G值抗菌能力不同，其中分子量在3 KDa的高G褐藻膠衍生物具有最高的抗菌活性，修

6、飾基團(tuán)中的三氮唑基團(tuán)和噻吩基團(tuán)對(duì)三種弧菌均產(chǎn)生較好的抗性，并且褐藻膠衍生物中3-噻吩并三氮唑-PEG-褐藻膠抗菌活性稍高。因此類衍生物安全性高、無(wú)毒的特點(diǎn)，有望作為水產(chǎn)藥物應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。
　　本研究通過(guò)還原、氧化、氨化、硫酸化反應(yīng)制得了20種褐藻膠類肝素衍生物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，衍生物MG1E、MG5E、MG2E、G2E的APTT值與能夠達(dá)到220s超過(guò)海洋藥物PSS，衍生物E主要是通過(guò)影響內(nèi)源性途徑和共同凝血途徑發(fā)揮抗凝作用，分子量