乳清抗氧化肽的制備及其生物活性研究.pdf

1、乳清是工業(yè)生產(chǎn)干酪及干酪素的副產(chǎn)品,具有豐富的營養(yǎng)價值,利用微生物發(fā)酵法制備生物活性肽,對于乳清資源的開發(fā)具有十分重要的意義。本論文利用乳酸菌發(fā)酵法制備乳清抗氧化活性肽,從發(fā)酵菌株的篩選到發(fā)酵條件的優(yōu)化、乳清多肽的分離純化及抗氧化活性檢驗進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。主要研究內(nèi)容如下:
　　 1.本論文采用液態(tài)發(fā)酵法,以水解度和氧自由基清除率為指標(biāo),從實驗室保存的6株乳酸菌中篩選出2株并建立了二元混菌體系。
　　 2.采用單因素實驗

2、和正交實驗優(yōu)化了乳清抗氧化活性肽發(fā)酵工藝,得到最佳工藝條件為:接種量5％,菌種比1:1,發(fā)酵溫度37℃,初始pH值6.4,時間16h,此時測得乳清水解產(chǎn)物O2·-清除率為39.45％,水解度為9.75％,肽含量為2.62mg/mL。
　　 3.乳清抗氧化活性肽發(fā)酵液經(jīng)6000Da膜超濾后冷凍干燥,溶解,經(jīng)SephadexG-25凝膠層析柱分離純化得到兩個組分,相對分子量分別為2031Da、328Da。超濾分離的工藝條件為:操作壓

3、力0.04MPa、超濾溫度25℃、超濾時間12min。與超濾液相比,透過液的氧自由基清除率提高了約29.5％,兩個組分的氧自由基清除率分別提高了25.5％和39.0％。
　　 4.體外抗氧化實驗結(jié)果顯示:乳清多肽具有一定的總還原能力,呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系;乳清多肽的總抗氧化能力隨濃度增加有較大提高,濃度由2mg/mL增加到10mg/mL時總抗氧化能力提高了近2.3倍;對羥自由基、氧自由基和DPPH自由基均有清除作用,并且清除率都與