菜籽粕蛋白提取及酶解肽的制備和抗氧化性研究.pdf

1、菜籽粕作為油菜籽加工的副產(chǎn)物具有廣闊的應(yīng)用前景，菜籽粕含有豐富的菜籽蛋白，因此對其深加工研究具有重要的意義。通過堿提酸沉的方法來提取菜籽蛋白，分離冷凍干燥得到的菜籽蛋白利用堿性蛋白酶進行酶解，隨后使用3000Da超濾管和SephadexG-15葡聚糖凝膠對制備得到的菜籽蛋白肽進行分離純化，冷凍干燥制備的菜籽蛋白肽根據(jù)不同濃度進行抗氧化性研究，并測其血常規(guī)。試驗獲得主要結(jié)果如下：
　?。?）菜籽蛋白的制備：研究了pH值、提取時間、溶

2、液料液比和提取溫度作為單因素對菜籽蛋白提取的影響，進一步設(shè)計正交試驗優(yōu)化了提取工藝。結(jié)果表明：當(dāng)提取pH值為12、提取時間為1h、溶液料液比為1:15、溫度為50℃時，菜籽蛋白提取率為54.77％，純度為91.77%。氨基酸檢測結(jié)果表明菜籽蛋白的營養(yǎng)價值較高，含有人體七種必需氨基酸，占菜籽蛋白總氨基酸的29.41%。
　?。?）菜籽蛋白肽的制備：研究了 pH值、底物濃度、提取溫度、提取時間和酶用量作為單因素對菜籽蛋白提取的影響，根

3、據(jù)單因素對試驗影響主次進一步設(shè)計正交試驗優(yōu)化了提取工藝。菜籽蛋白肽提取率為實驗標(biāo)準(zhǔn)，優(yōu)化菜籽蛋白肽提取的工藝流程。試驗結(jié)果表明：pH值為10.5、底物濃度為3%、提取溫度為50℃、提取時間為3h、酶用量3600U/g，菜籽蛋白肽得率為56.87%。而SephadexG-15葡聚糖凝膠對菜籽蛋白肽分離出四種不同相對分子量的肽為八肽、五肽、四肽和三肽分子質(zhì)量范圍為756-783、546-560、425-440和307-329Da。
　

4、?。?）菜籽蛋白肽抗氧化性研究：體外抗氧化性試驗表明，菜籽蛋白肽有較強的還原能力，對超氧陰離子和抑制羥基自由基有著較好的清除能力，體外抗氧化能力隨著這菜籽蛋白肽濃度的增加而增強，呈現(xiàn)一定的量效性。體內(nèi)空氧化性表明，對實驗小鼠進行灌胃菜籽蛋白肽100、200、400mg/kg·d30天，發(fā)現(xiàn)菜籽蛋白肽可以提升小鼠的抗氧化能力，使小鼠肝臟內(nèi)超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）活性提高，以及減少丙二醛（MDA）含量并且具有顯著影響。在