楊梅疏果核仁中苦杏仁苷的提取純化及其功能活性評價.pdf

1、楊梅疏果（Thinned bayberry）是由于楊梅果樹坐果率過高而采取的豐產(chǎn)措施，疏下來的果實通常被丟棄。楊梅疏果中的化學成分種類與成熟果實相當，其果核中同時含有苦杏仁苷（Amygdalin）成分。目前對楊梅疏果核仁(Thinnedbayberry kernel，TBK)中苦杏仁苷的研究較少。本研究通過超聲波輔助提取法提取TBK中的苦杏仁苷，并對其體外抗氧化活性和止咳祛痰功能進行了初步評價。研究結(jié)果如下:
　　(1)選取東魁、

2、荸薺、丁岙和晚稻四個不同品種楊梅的不同階段疏果的核仁為原料，測定TBK的物理化學性質(zhì)。結(jié)果顯示，隨著楊梅果實的成熟，核仁趨于飽滿，核仁占果核的比例不斷增加，最高達到8.76％。四個品種的TBK水分含量顯著下降(P＜0.05);粗脂肪和粗蛋白含量顯著增加(P＜0.05），總糖含量未呈現(xiàn)出規(guī)律性變化。這些TBK中水分、灰分、脂肪、蛋白質(zhì)和總糖的含量（以鮮重計）分別為30.16％-92.87％，0.53％-3.23％，0.54％-41.67％

3、，1.12％-20.67％和0.65％-3.38％。采用高效液相色譜法對各品種各階段TBK中的苦杏仁苷進行含量分析，發(fā)現(xiàn)TBK中苦杏仁苷的含量隨著果實的成熟均顯著增加(P＜0.05)，其中以丁岙種第三階段疏果的苦杏仁苷含量最高，達到28.25mg/g（以鮮重計）。
　　(2)采用超聲波輔助溶劑提取法，對丁岙種楊梅第三階段疏果核仁中的苦杏仁苷進行提取研究。在單因素和二水平試驗的基礎(chǔ)上，以苦杏仁苷的提取率作為響應(yīng)值，響應(yīng)面優(yōu)化后的提取

4、參數(shù)為:乙醇濃度27％(V/V)，料液比為1∶45(W/V)，提取時間為20min，超聲溫度為44℃，超聲功率為250W，此時TBK苦杏仁苷的實際提取率為93.80％，得率為4.60％。
　　(3)本研究建立了TBK粗提液中苦杏仁苷的分離純化方法，得到最佳純化工藝為:以D101型大孔樹脂為吸附介質(zhì);上樣液中苦杏仁苷初始濃度為129-358mg/L，上樣流速2BV/h;洗脫液為3 BV的純水以及隨后的11BV的乙醇-水溶液(40∶6

5、0，v/v)，洗脫流速2BV/h。經(jīng)過一次D101型大孔吸附樹脂處理，產(chǎn)物的純度為82.00％±1.71，純度約增加了17倍，其平均回收率為77.94％±4.39。
　　(4)采用DPPH和ABTS抗氧化體系，考察TBK粗提物和精提物的抗氧化活性。發(fā)現(xiàn)TBK提取物對DPPH自由基和ABTS自由基具有良好的清除效果，且提取物濃度與清除率表現(xiàn)出較好的相關(guān)性。經(jīng)分析計算得到粗提物與精提物清除DPPH自由基的IC50值分別為1335mg/

6、L和261mg/L，清除ABTS自由基的IC50值分別為1447mg/L和281mg/L。TBK精提物較粗提物表現(xiàn)出了更好的體外抗氧化活性。
　　(5)通過小鼠止咳祛痰功能試驗，得到TBK粗提物45、90、180mg/kg各劑量能夠不同程度地延長氨水引咳小鼠的咳嗽潛伏期，減少2min內(nèi)的咳嗽次數(shù)，其中90mg/kg劑量組咳嗽潛伏期較對照組明顯延長(P＜0.05）。TBK粗提物各劑量組以及苦杏仁苷標準品對小鼠氣管酚紅排泌量影響不顯著