pH敏感的前藥膠束納米粒的合成和抗腫瘤作用研究.pdf

1、本文通過化學(xué)合成法制備了一種具有pH敏感性的姜黃素前藥膠束納米粒。選用聚乙二醇單甲醚2000（mPEG2000）為引發(fā)劑，與D,L-丙交酯通過開環(huán)聚合反應(yīng)生成聚乙二醇單甲醚-聚乳酸（mPEG-PLA），利用丁二酸酐和乙烯氧基乙醇小分子作為連接基團(tuán)，將修飾后的單端羥基姜黃素與mPEG-PLA化學(xué)鍵和在一起，從而在mPEG-PLA末端與姜黃素分子之間引入縮醛鍵，使合成的姜黃素前藥聚合物（mPEG-PLA-acetal-cur）擁有pH敏感特

2、性。同時還合成了含有酯鍵的mPEG-PLA-cur作為對照。當(dāng)合成的兩種聚合物分子溶于水后，能夠在水中自組裝形成球狀膠束結(jié)構(gòu)。
　　本文對已合成的mPEG-PLA-acetal-cur和mPEG-PLA-cur的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了1H-NMR的表征。化學(xué)位移4.70處峰位的出現(xiàn)證明了縮醛鍵的成功合成。通過核磁氫譜計算兩種前藥聚合物的姜黃素接枝率分別為71％和63%。采用熒光色譜法測定兩種聚合物膠束的臨界膠束濃度分別為7.2±0.8μg/m

3、L和5.1±1.2μg/mL，證明兩種聚合物形成的膠束具有良好的稀釋穩(wěn)定性。采用動態(tài)光散射法（DLS）和透射電子顯微鏡（TEM）對聚合物膠束的粒徑分布和形貌進(jìn)行了表征。得出兩種聚合物膠束均具有較好的分散性，粒徑分別為90 nm和100 nm左右；TEM結(jié)果顯示兩種聚合物膠束均呈球形，在銅網(wǎng)上分布較均勻。紫外法測定了兩種聚合物的載藥量，其中mPEG-PLA-acetal-cur的載藥量為7.87±2.39%，mPEG-PLA-cur的為6

4、.63±0.04%。
　　mPEG-PLA-acetal-cur聚合物膠束的藥物釋放實(shí)驗(yàn)，選用了pH5.0、pH6.0和pH7.4的磷酸鹽-檸檬酸緩沖液作為釋放介質(zhì)，結(jié)果表明在三種pH條件下，姜黃素的累積釋放率分別為45.6%，36.4%和19.6%。在酸性釋放介質(zhì)（pH5.0和pH6.0）中姜黃素明顯比中性釋放介質(zhì)（pH7.4）中釋放的要快，從而展現(xiàn)出mPEG-PLA-acetal-cur的pH敏感特性。作為對比測定了mPEG-

5、PLA-cur在三種pH條件下的姜黃素釋放率，姜黃素的累積釋放率明顯低于酸性條件下mPEG-PLA-acetal-cur的釋放率，從而進(jìn)一步證明了本文所合成的含有縮醛鍵的姜黃素前藥膠束納米粒的優(yōu)越性。
　　實(shí)驗(yàn)選用HepG2細(xì)胞對不同樣品的細(xì)胞毒性和細(xì)胞攝取情況進(jìn)行了考察，從細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果可以得出，含有縮醛鍵的姜黃素前藥聚合物的細(xì)胞毒性明顯強(qiáng)于含酯鍵前藥聚合物。攝取結(jié)果表明，具有pH敏感性的姜黃素前藥聚合物相比酯鍵聚合物擁有更佳