阿霉素雙效前體藥的設計合成及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、目的：根據(jù)前藥原理，分別將塞來昔布或α-亞麻酸與阿霉素以適當?shù)男问浇M合為雙效前體藥物，期望達到提高阿霉素療效，減輕阿霉素的毒副作用的目的。
　　方法：1.以丁二酸酐作為交聯(lián)劑，將塞來昔布的磺酰氨基和阿霉素3’位的氨基通過酰胺鍵連接，形成塞來昔布-阿霉素雙效前體藥物。2.將α-亞麻酸制成Boc保護的α-亞麻酰肼，然后脫去Boc保護，再與阿霉素13位的羰基反應得到腙鍵連接的α-亞麻酸-阿霉素雙效前體藥物。3.以IC50為指標，以阿霉素

2、為陽性對照，以不含藥物的培養(yǎng)液為空白對照，將不同濃度的兩種阿霉素雙效前體藥與人肝癌細胞（HepG2）細胞孵育48h，采用MTT法檢測兩種雙效前體藥對HepG2細胞的生長抑制作用，觀察雙效前體藥的體外抗腫瘤活性。4.大鼠尾靜脈注射塞來昔布-阿霉素雙效前體藥，在設定的各個時間點眼眶取血并抗凝，離心分離血漿，用乙酸乙酯提取血漿中塞來昔布-阿霉素雙效前體藥、阿霉素、塞來昔布琥珀酸單酯、塞來昔布，氮氣吹干樣品，殘留物用50μL甲醇溶解，振勻，取2

3、0μL用于LC/MS/MS分析。流動相：乙腈/水（1‰甲酸）（70:30,V/V）；選用電噴霧電離負離子(ESI-)，多反應監(jiān)測(MRM)方式檢測四種藥物的含量。
　　結果：1.合成了兩種阿霉素雙效前體藥，并進行了結構表征，結果表明合成的化合物為目標化合物。2.阿霉素對HepG2細胞的IC50為5μM，塞來昔布-阿霉素雙效前體藥（C-DOX）的IC50為32μM，α-亞麻酸-阿霉素雙效前體藥（L-DOX）的IC50與9μM。3.用

4、LC/MS/MS法測定大鼠血漿中藥物濃度，檢測C-DOX的線性范圍為1-2000ng/mL，工作曲線回歸方程為y=0.01x-0.1134；檢測阿霉素（DOX）、塞來昔布琥珀酸單酯（CELA）和塞來昔布(CEL)的線性范圍為1-200ng/mL，工作曲線回歸方程分別為y=0.0006x-0.0002，y=0.0018x+0.0076和y=0.0016x+0.0006,日內(nèi)、日間精密度(RSD)均小于15％，血漿中四種物質(zhì)低、中、高三個濃

5、度的回收率均在90-110％。大鼠尾靜脈注射10mg/kgC-DOX后，C-DOX、DOX、CELA、CEL的曲線下面積分別為1133ng·h·mL-1、272ng·h·mL-1、243ng·h·mL-1和313ng·h·mL-1。
　　結論：1.經(jīng)過波譜鑒定，所合成的兩種阿霉素雙效前體藥均為目標化合物。2.合成的兩種阿霉素雙效前體藥物能夠抑制人肝癌HepG2細胞的生長，α-亞麻酸-阿霉素雙效前體藥對HepG2細胞的抑制活性更強。