導(dǎo)電纖維支架調(diào)控心肌細(xì)胞和肝細(xì)胞的研究.pdf

1、電紡纖維支架能夠很好地模擬細(xì)胞胞外基質(zhì)(ECM)的天然空間結(jié)構(gòu)，非常適合細(xì)胞的支撐生長(zhǎng)，利于形成類(lèi)組織體，但常規(guī)聚合物纖維支架缺乏導(dǎo)電性，難于滿(mǎn)足培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞和心肌細(xì)胞等的要求。因此，本論文將多壁碳納米管(CNT)摻雜到高分子聚合物中，并使用高速轉(zhuǎn)動(dòng)接收器制備了不同形貌和電導(dǎo)率的定向纖維支架。聚乙二醇-聚乳酸(PELA)和CNT以不同比例混合，制備了不同電導(dǎo)率的混紡和同軸紡纖維支架，并用于心肌細(xì)胞的研究;聚苯乙烯馬來(lái)酸酐(PMSA)和C

2、NT以不同比例混紡得到導(dǎo)電纖維支架，經(jīng)半乳糖修飾后，用于肝細(xì)胞的研究。
　　心肌細(xì)胞在混紡和同軸紡PELA/CNT導(dǎo)電纖維支架上生長(zhǎng)良好，細(xì)胞狹長(zhǎng)鋪張，與纖維支架取向一致，形成定向的心肌膜片。結(jié)果表明，從心肌細(xì)胞的活力、遷移和蛋白表達(dá)等方面比較，同軸紡纖維支架的綜合性能優(yōu)于混紡導(dǎo)電支架。培養(yǎng)5天后心肌細(xì)胞鋪展生長(zhǎng)，但沒(méi)有形成大片區(qū)，且跳動(dòng)頻率不同步，其中CNT含量為4-5％纖維支架上的心肌細(xì)胞優(yōu)于其他組，細(xì)胞鋪展、蛋白表達(dá)較為突出

3、。培養(yǎng)10天后心肌細(xì)胞鋪展成片，細(xì)胞更為狹長(zhǎng)，跳動(dòng)頻率一致，尤其是在CNT含量為4％的同軸紡支架上，心肌細(xì)胞鋪滿(mǎn)整個(gè)支架，且長(zhǎng)寬比值達(dá)到為6.5，同步跳動(dòng)頻率達(dá)到80次/min，體現(xiàn)出心肌細(xì)胞和導(dǎo)電纖維支架的電機(jī)械耦合良好，適于心肌膜片的研究。
　　肝細(xì)胞在PSMA/CNT導(dǎo)電纖維支架上粘附聚集成球，3天后在支架上恢復(fù)細(xì)胞極性，開(kāi)始部分肝細(xì)胞功能，如白蛋白分泌和尿素合成;培養(yǎng)7天和15天后，與其他支架相比，在CNT含量為3％的支架

4、上肝細(xì)胞成球良好，約為100μm，保持肝功能良好且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。進(jìn)一步研究了對(duì)甲苯磺丁脲、S-華法林、咪達(dá)唑侖、睪酮、對(duì)乙酰氨基酚等藥物在此肝細(xì)胞培養(yǎng)體系上的代謝清除率，結(jié)果表明與體內(nèi)代謝具有一定的相關(guān)性，尤其CNT含量為3％的支架上培養(yǎng)的肝細(xì)胞，其體內(nèi)-體外相關(guān)系數(shù)為0.663;同時(shí)在利福平、谷胱甘肽、酮康唑、丙磺舒等酶誘導(dǎo)劑或抑制劑作用下，研究CYP3A4和Ⅱ相酶的酶活性、睪酮和對(duì)乙酰氨基酚的代謝清除率，結(jié)果表明該肝細(xì)胞模型能夠較好地