內(nèi)源性DNA加合物方法建立及人群生物監(jiān)測.pdf

1、DNA加合物是一類極其重要的生物標志物，既可以作為接觸（暴露）生物標志物，準確反映化學毒物接觸的內(nèi)劑量來評價化學毒物的毒性，為人群生物監(jiān)測及分析致癌性化學污染物的暴露提供有效的手段，又可以作為效應(yīng)標志物，篩檢高危人群，為生物體的癌癥風險評價提供重要信息，同時，可發(fā)展合理的癌癥預防和治療策略。在人類組織中絕大多數(shù)的突變，可以確定是內(nèi)源性的。內(nèi)源性DNA損傷比起外源性發(fā)生的頻率更高。因此，內(nèi)源性DNA加合物的檢測是毒理學研究的重點，具有重要

2、的應(yīng)用價值。但內(nèi)源性DNA加合物在人體中含量很低，這就要求檢測方法靈敏度要高、檢測限低、特異性要好。
　　長期接觸苯誘發(fā)再生障礙性貧血和白血病的因果關(guān)系已經(jīng)流行病學的研究證實。本研究以基于隊列的橫斷面研究為基礎(chǔ)，通過建立高特異性、高靈敏度和高通量的UPLC-MS-MS檢測方法，檢測接苯作業(yè)工人和非接苯作業(yè)工人生物樣本（尿、血）中內(nèi)源性etheno-DNA加合物作為生物標志物，研究苯誘發(fā)氧化應(yīng)急和脂質(zhì)過氧化“二次打擊”導致的DNA氧

3、化損傷與機體抗氧化防御機制之間的關(guān)聯(lián)，揭示苯中毒和致癌新的分子機制，為苯中毒和致癌早期臨床診斷和治療提供理論依據(jù)。本文的主要研究內(nèi)容包括以下兩個方面:
　　1、在本實驗室研究基礎(chǔ)上，建立和優(yōu)化了UPLC-ESI-MS/MS檢測血中etheno-DNA(εdA，εdC)加合物的方法。本方法靈敏度高，檢測限低，回收率好，樣品需求量小(20μg)，最低可以檢測5μgDNA。該方法能夠用于大樣本血中εdA，εdC的定量分析。εdA，εdC