跳舞蜂腦部生物胺、miRNAs、基因表達(dá)譜檢測(cè)分析.pdf

1、作為一種重要的社會(huì)性昆蟲(chóng)，蜜蜂具有非常復(fù)雜的社會(huì)行為。對(duì)蜜蜂復(fù)雜行為中舞蹈語(yǔ)言的研究不僅是研究蜜蜂復(fù)雜行為神經(jīng)和分子機(jī)制的重要切入口，而且對(duì)蜜蜂采集性能的選育提高具有非常重要的意義.本研究從神經(jīng)遞質(zhì)（生物胺）、microRNA和表達(dá)譜三個(gè)水平比較了采集蜂和跳舞蜂腦部和頭部小分子的差異，以期尋找與采集和舞蹈行為相關(guān)的小分子。
　　 利用高效液相色譜法檢測(cè)蜜蜂不同跳舞狀態(tài)下腦部生物胺的種類(lèi)和含量，在不同跳舞狀態(tài)和不同采集距離回巢跳舞

2、的蜜蜂腦部均檢測(cè)到較高濃度的去甲腎上腺素（NE）、多巴克(DOPAC)和多巴胺(DA)，且這三種生物胺在不同跳舞狀態(tài)下濃度變化不顯著。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，跳舞蜂腦部的NE濃度高于DA的濃度，DA的濃度高于DOPAC的濃度.
　　 采用新一代高通量測(cè)序技術(shù)(Solexa)構(gòu)建采集蜂和跳舞蜂兩個(gè)小RNA庫(kù)。通過(guò)序列測(cè)定與分析，在采集蜂和跳舞蜂中發(fā)現(xiàn)54條已知的miRNAs，其中32條miRNAs在跳舞蜂中顯著下調(diào).ame-miR-278,am

3、e-miR-210，ame-miR-282和ame-miR-34的fold-change絕對(duì)值大于2，對(duì)這4條miRNAs進(jìn)行驗(yàn)證，證實(shí)ame-miR-278和ame-miR-282在跳舞蜂中確實(shí)顯著下調(diào)，而兩者對(duì)應(yīng)的靶基因多與激酶、神經(jīng)功能、突觸結(jié)合蛋白和能量代謝等有關(guān)。
　　 利用新一代高通量測(cè)序技術(shù)(Solexa)測(cè)定采集蜂和跳舞蜂的兩個(gè)數(shù)字基因表達(dá)譜，分別獲得4，286，250和3，453，088條高質(zhì)量序列，分別為原始

4、序列的92.51％和93.03％。測(cè)序飽和度和實(shí)驗(yàn)重復(fù)性分析結(jié)果顯示測(cè)序結(jié)果穩(wěn)定可靠.通過(guò)比較分析篩選出1，898條具有顯著差異的基因，其中506條在采集蜂中顯著上調(diào)，1，392條在跳舞蜂中顯著上調(diào)。采集蜂中顯著上調(diào)的基因中有6條編碼嗅覺(jué)相關(guān)蛋白，而跳舞蜂中顯著上調(diào)的基因中有10條與神經(jīng)功能相關(guān).
　　 綜合分析生物胺、microRNA和mRNA的檢測(cè)結(jié)果，在三部分中均發(fā)現(xiàn)參與酪氨酸代謝途徑的分子，推測(cè)酪氨酸代謝途徑參與蜜蜂的采