白藜蘆醇穩(wěn)定性及與T2毒素對(duì)HepG2細(xì)胞作用的研究.pdf

1、白藜蘆醇存在于花生、葡萄、虎杖等植物中,具有抗氧化、消除自山基、抗細(xì)菌和抗真菌、保護(hù)心血管等作用。實(shí)驗(yàn)所用白藜蘆醇為西南大學(xué)藥學(xué)院提供。應(yīng)用HPLC考察了白藜蘆醇干粉在高溫、高濕、強(qiáng)光照條件下0天、5天、10天的變化情況,同時(shí)設(shè)計(jì)了同光、溫度、酸、堿、氧化劑、pH對(duì)白藜蘆醇溶液穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明,白藜蘆醇干粉在高溫、高濕條件下性質(zhì)較為穩(wěn)定,在強(qiáng)光照條件下性質(zhì)不穩(wěn)定。白藜蘆醇溶液在日光照射下一小時(shí),含量下降明顯:60℃溫度作用白藜蘆醇

2、溶液一小時(shí),含量出現(xiàn)下降。白藜蘆醇溶液對(duì)日光、溫度均表現(xiàn)出不穩(wěn)定性。酸、堿、氧化劑均對(duì)白藜蘆醇溶液的穩(wěn)定性存在破壞作用。當(dāng)pH為4-7時(shí),白藜蘆醇溶液較穩(wěn)定,當(dāng)pH偏堿性時(shí)(pH=8、9)時(shí),白藜蘆醇溶液穩(wěn)定性較差,隨著作用時(shí)問(wèn)延長(zhǎng),反式白藜蘆醇可轉(zhuǎn)化成順式白藜蘆醇。實(shí)驗(yàn)同時(shí)還用熔點(diǎn)儀測(cè)得白藜蘆醇干粉熔點(diǎn)為248.8-250.4℃,3,4',5三乙酰白藜蘆醇干粉熔點(diǎn)為112.8-114.3℃。
　　 T2毒素為A類(lèi)單端孢霉烯族毒

3、素中毒性最強(qiáng)的一種化合物,存在于被污染的玉米、小麥等糧食作物中,對(duì)人畜健康有著較大的危害。為了初步研究T2毒素對(duì)細(xì)胞的毒性作用,實(shí)驗(yàn)以HepG2肝癌細(xì)胞為研究載體,設(shè)定不同終濃度的T2毒素作用不同時(shí)間(24h、48h)。MTT法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)隨著T2毒素終濃度升高及作用時(shí)間延長(zhǎng),HepG2肝癌細(xì)胞存活率下降。當(dāng)T2毒素與白藜蘆醇及其乙?；苌锫?lián)合作用于HepG2肝癌細(xì)胞時(shí),聯(lián)合作用實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞OD值要高于T2毒素組,這表明白藜蘆醇及其乙?；?/p>

4、生物可在一定程度上保護(hù)HepG2肝癌細(xì)胞免受T2毒素侵襲,誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化是T2毒素毒性機(jī)制之一,而白藜蘆醇及其乙?；苌锞哂锌寡趸芰?。實(shí)驗(yàn)還通過(guò)倒置顯微鏡觀察12毒素對(duì)HepG2肝癌細(xì)胞形態(tài)的影響。正常HepG2肝癌細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形或多角形,細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),細(xì)胞之間擺列緊密;當(dāng)T2毒素作用HepG2肝癌細(xì)胞48h后,懸浮細(xì)胞增多,細(xì)胞有皺縮現(xiàn)象且細(xì)胞之間分離度增大。
　　 采用硫代巴比妥酸(TBA)法和硫氰酸鐵(FTC)法