版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、腫瘤的發(fā)生是一個多基因參與的過程,其一個重要起因是腫瘤細(xì)胞的異常增殖,而在細(xì)胞體內(nèi)存在組蛋白乙?;腿ヒ阴;g的動態(tài)平衡,已有研究表明,兩者之間平衡的失調(diào)將導(dǎo)致某些特定基因表達(dá)異常,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖,進(jìn)而加速腫瘤的發(fā)生發(fā)展。研究顯示蜂毒素能夠抑制組蛋白去乙?;?而蜂毒素是一種從蜂毒中提取的水溶性多肽,是其重要組成成分及活性成分,其具有抗腫瘤活性,但其具體的作用機(jī)制未明。為了進(jìn)一步探討蜂毒素的抗腫瘤作用機(jī)制,本文主要從體外觀察蜂毒素對
2、HepG2細(xì)胞增殖的影響,并探討其部分作用機(jī)制。研究內(nèi)容由以下四個部分組成。
1.蜂毒素對HepG2細(xì)胞增殖的影響。
實驗以人肝細(xì)胞癌HepG2細(xì)胞為研究對象,分為陰性對照組,蜂毒素組(1,4 and8μg/ml)和陽性對照組(TSA)。MTT法檢測蜂毒素對HepG2細(xì)胞活力的影響,流式細(xì)胞術(shù)檢測蜂毒素對細(xì)胞周期的影響,及Western blot和RT-PCR檢測細(xì)胞周期因子CyclinD1和CDK4的表達(dá)。實驗結(jié)果
3、表明,蜂毒素對HepG2細(xì)胞的增殖具有抑制作用,并呈濃度依賴性,同時周期G0/G1期細(xì)胞數(shù)隨濃度上升,而S期細(xì)胞數(shù)則逐漸減少。蜂毒素對細(xì)胞增殖的抑制阻止在細(xì)胞周期的G1/S期,并且細(xì)胞周期因子CyclinD1和CDK4的表達(dá)逐漸降低。由此說明,蜂毒素具有抑制HepG2細(xì)胞增殖的作用。
2.蜂毒素恢復(fù)PTEN的表達(dá)及降低其下游Akt的磷酸化水平。
實驗分組同上。Real-time PCR方法檢測PTEN的mRNA的表達(dá)
4、,Western blot檢測PTEN、p-Akt蛋白的表達(dá)。實驗結(jié)果表明,與陰性對照組比較,蜂毒素上調(diào)PTEN的表達(dá),同時降低了磷酸化Akt的表達(dá)。由此說明,蜂毒素抑制細(xì)胞增殖的作用可能與其上調(diào)了PTEN的表達(dá)有關(guān)。
3.HDAC2參與調(diào)控PTEN表達(dá)的機(jī)制研究。
1)HDAC2 siRNA沉默:根據(jù)HDAC2設(shè)計并合成siRNA,通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染到HepG2細(xì)胞內(nèi),實驗分為陰性對照組,Scramble siRNA組
5、和HDAC2 siRNA組。RT-PCR檢測HDAC2和PTEN的mRNA的表達(dá),Western blot檢測HDAC2、ac-H3、PTEN和p-Akt的蛋白的表達(dá)。實驗結(jié)果顯示,與陰性對照組比較,靶向沉默HDAC2后PTEN的表達(dá)顯著上調(diào),降低磷酸化Akt的表達(dá),并促進(jìn)組蛋白H3的乙酰化,而Scramble siRNA組各基因的表達(dá)無顯著差異。
2)HDAC2重組質(zhì)粒的過表達(dá):實驗分為陰性對照組、空載體組、HDAC2質(zhì)粒組
6、。Real-time PCR方法檢測PTEN mRNA的表達(dá),Western blot檢測PTEN、p-Akt和ac-H3蛋白的表達(dá)。實驗結(jié)果顯示,與陰性對照組比較,HDAC2過表達(dá)后PTEN的表達(dá)顯著下降,磷酸化的Akt的表達(dá)增高,并抑制組蛋白H3的乙?;?而空載體組各基因的表達(dá)無顯著差異。上述結(jié)果表明HDAC2參與了PTEN基因表達(dá)的調(diào)控。
4.蜂毒素對HDAC2的調(diào)控作用研究:實驗分為陰性對照組,蜂毒素組(1,4 and
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- α-蒎烯抑制HepG2細(xì)胞增殖及相關(guān)機(jī)制研究.pdf
- 黃連素抑制HepG2細(xì)胞增殖及下調(diào)VEGF的實驗研究.pdf
- 漢黃芩素抑制HepG2細(xì)胞增殖及其作用機(jī)制的研究.pdf
- 芝麻素抑制肝癌HepG2細(xì)胞增殖的機(jī)制研究.pdf
- 淫羊藿素抑制肝癌HepG2細(xì)胞增殖機(jī)制初步研究.pdf
- 吉馬酮抑制肝癌HepG2細(xì)胞增殖機(jī)制研究.pdf
- 納米金聯(lián)合BSO抑制HepG2細(xì)胞增殖及其機(jī)制的研究.pdf
- 斑蝥酸鈉抑制人肝癌HepG2細(xì)胞增殖及其機(jī)制的研究.pdf
- Nodosin對HepG2細(xì)胞株的增殖抑制作用和作用機(jī)制.pdf
- 露蜂房蛋白[NVP(1)]抑制HepG2細(xì)胞增殖的機(jī)制研究.pdf
- 康萊特對肝癌細(xì)胞HepG2體外增殖的抑制作用及機(jī)制.pdf
- β-欖香烯抑制HepG2細(xì)胞侵襲及遷移的作用機(jī)制研究.pdf
- 含rAFP的蜂毒素基因重組腺病毒轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞HepG2后的作用機(jī)制研究.pdf
- rBTI上調(diào)PTEN表達(dá)抑制HepG2細(xì)胞增殖的研究.pdf
- 微囊藻毒素對HepG2細(xì)胞的毒性及其作用機(jī)制研究.pdf
- 歸肝經(jīng)中藥對肝癌HepG2細(xì)胞增殖抑制及凋亡誘導(dǎo)作用研究.pdf
- 下調(diào)MAEL和上調(diào)CDH1基因表達(dá)抑制肝癌HepG2細(xì)胞的遷移和增殖研究.pdf
- 褪黑素增強(qiáng)阿霉素對HepG2細(xì)胞株的增殖抑制作用及其機(jī)制研究.pdf
- S1P通過抑制HDAC2活性改善心肌肥大的作用及其機(jī)制研究.pdf
- 甲胎蛋白調(diào)控肝癌細(xì)胞(HepG2)增殖的作用機(jī)制研究.pdf
評論
0/150
提交評論