熒光定量PCR檢測牛乳中金黃色葡萄球菌耐熱腸毒素A基因.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：建立熒光定量PCR檢測牛乳中產(chǎn)腸毒素A基因的金黃色葡萄球菌的方法。
　　 方法：以金黃色葡萄球菌耐熱腸毒素A保守序列為目標(biāo),根據(jù)GenBank公布的金黃色葡萄球菌SEA基因序列,設(shè)計了2對引物。在對臨床分離的金黃色葡萄球菌基因組DNA測序正確后,在鑒定其特異性及靈敏度的基礎(chǔ)上建立了檢測牛乳中金黃色葡萄球菌腸毒素A基因的熒光定量PCR檢測方法。
　　 結(jié)果：成功克隆了金黃色葡萄球菌SEA基因保守區(qū)序列。全序列由774

2、個堿基構(gòu)成,克隆序列與Genbank公布參比序列相似性達到了99％。熒光定量檢測引物的特異性良好,標(biāo)準(zhǔn)曲線符合要求,靈敏度水平也達到49.5fg。對人工污染的牛乳中含SEA的金黃色葡萄球菌的檢測結(jié)果顯示,檢出細菌檢測限為200CFU/mL。
　　 結(jié)論：成功克隆牛源金黃色葡萄球菌SEA序列,并建立了快速撿測牛乳中含SEA的金黃色葡萄球菌的熒光定量PCR方法,為快速檢測牛原料乳中含有腸毒素A基因的金黃色葡萄球菌提供了有效的技術(shù)支撐

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