蜂毒肽分離純化與體內(nèi)外抗HSV-1病毒作用研究.pdf

1、近年來由單純皰疹病毒I型引起的疾病發(fā)病率不斷上升且伴有病毒耐藥株的出現(xiàn),為此我們開展了蜂毒肽抗HSV-1作用的研究。研究結(jié)果如下:
　　 利用QF-1型超級蜜蜂電子自動取毒器采集意蜂蜂毒,通過葡聚糖凝膠層析分離純化,再進行SDS-PAGE電泳鑒定,證實其為電泳級純度的蜂毒肽,供后續(xù)實驗使用。
　　 利用非洲綠猴腎細胞(Vero細胞)培養(yǎng)體外模型,采用細胞病變法,阿昔洛韋(ACV)作對照,探討蜂毒肽有無體外抗HSV-1活性

2、。結(jié)果顯示,通過MTT法測得蜂毒肽對Vero細胞的半數(shù)毒性濃度(CC50)為10-2.1mg/100μL。當(dāng)利用100μL9CC50的蜂毒肽時能夠使病毒抑制率達到66.51％。病毒的半數(shù)感染量(TCID50)為10-5.2/100μL。用HSV-1病毒建立小鼠腦炎模型,以ACV作為陽性對照物,對蜂毒肽體內(nèi)抗HSV-1病毒的活性進行評估。結(jié)果顯示,HSV-1病毒對小鼠的半數(shù)致死量(LD50)為10-3mg/kg;蜂毒肽可以使染毒小鼠存活率

3、從20％提高到50％,具有明顯抑制HSV-1病毒的作用,并具有延長小鼠存活時間的作用。
　　 設(shè)計四組蜂毒肽抗HSV-1病毒作用靶點作為四個試驗組,分別探討蜂毒肽對HSV-1病毒的直接作用、病毒的吸附、合成及釋放是否有影響。結(jié)果顯示:(1)四個濃度梯度1CC50,3CC50,6CC50,9CC50的蜂毒肽對HSV-1病毒的吸附均有抑制作用,抑制率分別為31.25％,32.92％,32.92％,32.08％,其中蜂毒肽對HSV-1

4、病毒的最高抑制率為32.92％;(2)1CC50,3CC50,6CC50,9CC50四個濃度梯度的蜂毒肽對HSV-1病毒的合成均有抑制作用,抑制率分別為29.05％,29.91％,31.69％,33.06％,其中蜂毒肽對HSV-1病毒合成的最高抑制率為33.06％;(3)1CC50,3CC50,6CC50,9CC50四個濃度梯度的蜂毒肽對HSV-1病毒的釋放均有抑制作用,抑制率分別為29.31％,18.37％,13.28％,10.70％