重組人膠原蛋白在巴氏畢赤酵母中分泌表達(dá)條件研究.pdf

1、膠原蛋白是廣泛存在于低等脊椎動物和哺乳動物機(jī)體中的一類蛋白質(zhì)，也是哺乳動物體內(nèi)含量最多的一類蛋白質(zhì)，約占動物體蛋白質(zhì)總量的25％-30％。膠原蛋白有著很好的生物活性，可做成醫(yī)學(xué)材料及美容制品。但是現(xiàn)今人們通過酸法、堿法和酶法從動物皮毛和結(jié)締組織中獲取的膠原蛋白往往存在活性低，有病毒隱患，且安全性差，有排異反應(yīng)等缺陷，限制了它的臨床應(yīng)用。采用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)的膠原蛋白可以克服以上不足，例如本文的前期工作就是基于蛋白質(zhì)工程和基因工程技術(shù)設(shè)計

2、、合成人源膠原蛋白基因不同序列，再將其轉(zhuǎn)入宿主中表達(dá)得到類似于人膠原蛋白的目的蛋白。 本文在本實驗室成功構(gòu)建的表達(dá)類人膠原蛋白的重組巴斯德畢赤酵母GS115/pPIC9KG6基礎(chǔ)上，對其表達(dá)外源蛋白的發(fā)酵、誘導(dǎo)條件進(jìn)行了研究。從誘導(dǎo)溫度、pH值、甲醇添加量、誘導(dǎo)期選擇、轉(zhuǎn)速、發(fā)酵時間、初始誘導(dǎo)菌濃等方面對構(gòu)建的基因工程菌—巴氏畢赤酵母甲醇利用快型的搖瓶發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，為下一步高密度發(fā)酵表達(dá)類人膠原蛋白的研究提供參考數(shù)據(jù)。經(jīng)過