豬胎盤(pán)功能性肽的分離純化及其活性的初步研究.pdf

1、ZhejiangA&FUniversityDissertationfortheDegreeofMasterStudiesontheIsolation，PurificationandActivitiesofFunctionalpeptidesfromPigplacentaCandidate：SHIYumiaoAdviser：ZHANGYouZUO，ProfessorSpecialty：FoodprocessingandsecurityDa

2、teofSubmission：June，2013ZhejiangA&FUniversityLin’an，zhejiangprovince，PRChinaJune，2013鎣摘要摘要胎盤(pán)肽是人類(lèi)功能性食品研究和開(kāi)發(fā)的重要資源，豬胎盤(pán)是未被充分開(kāi)發(fā)利用的資源，它含有人體所必需的多種氨基酸，像纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸等，它還具有調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、增強(qiáng)免疫、補(bǔ)血美容、增強(qiáng)記憶、抗應(yīng)激等功效。充分探索其生物活性功能，開(kāi)發(fā)具有特殊生物活性，如抗氧化性、降血

3、壓性等的功能性食品或生物制品，具有重要的理論和實(shí)踐意義。本文以豬胎盤(pán)作為原料，采用胃蛋白酶水解制備豬胎盤(pán)功能性短肽，研究其生物活性，旨在為豬胎盤(pán)功能性肽的充分利用提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：(1)采用正交試驗(yàn)，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，得到最佳工藝酶為胃蛋白酶，最佳工藝條件為酶與底物比13％、pH25、溫度30。C，在最佳工藝條件下制得的豬胎盤(pán)酶解液粗提物的還原力為13257，水解度為4138％。(2)利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，測(cè)得豬胎盤(pán)

4、酶解液的胎盤(pán)肽含量為1737mg／mL：紫外掃描豬胎盤(pán)酶解液，得到其最大吸收峰為205nlTl。(3)采用SDSPAGE驗(yàn)證不同分子量酶解液的正確性，對(duì)不同分子量的豬胎盤(pán)酶解液的DPPH自由基清除活性這一主要指標(biāo)的測(cè)定，得知3KD的豬胎盤(pán)酶解液的活性最好，其DPPH自由基清除活性的IC50值為997mg／mL。將其經(jīng)過(guò)SephadexG25和SephadexG10的分離純化，得到了活性較高的峰B組分，其DPPH自由基清除活性和ACE抑制

5、活性的ICso值分別為789mg／mL和1269mg／mL。(4)以DPPH作為主要指標(biāo)，對(duì)分離純化后的豬胎盤(pán)酶解液經(jīng)高溫、低溫、酸和堿處理，得到處理后的酶解液的DPPH自由基清除活性的IC50值分別為989mgimL、95mg／mL、894mg／mL、963mg／mL，與未處理的豬胎盤(pán)酶解液的IC50值789mg／mL相比，經(jīng)過(guò)高溫、低溫和酸堿處理后的豬胎盤(pán)酶解液的DPPH自由基清除活性均有小幅度降低，但變化幅度不大，說(shuō)明酶解得到的豬