中藥中桔青霉素檢測方法的研究.pdf

1、桔青霉素(Citrinin)是青霉屬(Penicillium)、曲霉屬(Aspergillus)、紅曲霉屬(Monascus)中的絲狀霉菌代謝產(chǎn)生的一種真菌毒素,在自然界中分布極其廣泛。桔青霉素有致畸、致癌、致突變的潛在危害,而且還與某些地方性疾病的發(fā)生有密切聯(lián)系,對人畜健康的危害十分嚴重。鑒于桔青霉素在食品、農(nóng)產(chǎn)品中的普遍性和危害性,特別是近年來國內(nèi)市場上紅曲產(chǎn)品中桔青霉素的污染普遍性,大大影響了人們的身體健康和紅曲產(chǎn)品的出口貿(mào)易,因

2、此應(yīng)繼續(xù)加強紅曲產(chǎn)品中桔青霉素檢測方法的建立和相關(guān)限量標準的完善,以保證食品安全。此外,應(yīng)當重視的是,傳統(tǒng)藥用植物與農(nóng)產(chǎn)品、飼料相比,在生長、收獲、運輸和貯藏期間同樣存在被產(chǎn)毒霉菌污染的可能性,因此很有必要建立一套中藥中桔青霉素的檢測方法,制訂其合理的限量標準,以保證中藥的安全有效。國內(nèi)外對桔青霉素建立了多種檢測分析方法,但這些分析方法只限于對食品、農(nóng)產(chǎn)品以及飼料中毒素的分析,對中藥中桔青霉素的分析,涉及還比較少。本文建立了紅曲產(chǎn)品以及

3、中藥中桔青霉素的檢測方法。主要研究內(nèi)容和結(jié)論如下:
　　 1、建立了紅曲及其制品中桔青霉素的高效液相色譜檢測方法及質(zhì)譜確證方法,并對國內(nèi)市場上紅曲樣品進行了污染狀況調(diào)查。
　　 紅曲樣品經(jīng)甲醇-水(70:30,v／v)混合溶劑提取,通過桔青霉素免疫親和柱(IAC)凈化,采用HPLC-FLD測定,并對測定結(jié)果進行LC-MS／MS確證。該法檢測限為0.8μg／kg,線形范圍為0.1-1000 ng／mL,在25—200μg／

4、kg添加水平下,回收率范圍在73.4％-89.4％,相對標準偏差范圍為2.1％-7.9％。對國內(nèi)市場上59批紅曲樣品進行了分析測定,調(diào)查顯示其中有29批樣品檢測為陽性,污染水平為16.62-5252.90μg／kg,該方法簡單、準確、可靠,可用于紅曲及其制品中桔青霉素的檢測分析。
　　 2、建立了中藥材及其制品中桔青霉素的高效液相色譜檢測方法,并對國內(nèi)中藥市場的中藥樣品進行了污染狀況調(diào)查。
　　 中藥樣品經(jīng)甲醇-水(70

5、:30,v／v)混合溶劑提取,通過桔青霉素免疫親和柱(IAC)凈化,采用HPLC-FLD測定。該法檢測限為0.8μg／kg,在25-200μg／kg添加水平下,不同基質(zhì)中藥的回收率范圍在79.2％-92.5％,相對標準偏差范圍1.4％-4.8％。對國內(nèi)市場上50批中藥樣品進行了分析測定,在該檢測限以上沒有樣品含有桔青霉素。該方法簡單、準確、可靠,可用于中藥中桔青霉素的檢測分析。
　　 3、建立了中藥中桔青霉素的高效液相色譜-串聯(lián)

6、質(zhì)譜檢測方法。
　　 樣品經(jīng)甲醇-水(70:30,v／v)混合溶劑提取后,通過桔青霉素免疫親和柱(IAC)凈化,采用LC-MS／MS法測定中藥中的桔青霉素。質(zhì)譜采用電噴霧電離(ESI),多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)方式分別監(jiān)測離子對m／z251→m／z233(桔青霉素)和m／z472→m／z436(內(nèi)標特非那定)。以桔青霉素和內(nèi)標特非那定峰面積的比值對桔青霉素的濃度作線性回歸,桔青霉素在0.1-50 ng／mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,日