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文檔簡介
1、目的:
觀察肌細(xì)胞增強因子2A(MEF2A)在難治性癲癇患者與癲癇大鼠腦組織中的表達(dá),研究其與癲癇發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
方法:
1.病人:本實驗納入20例難治性癲癇患者顳葉手術(shù)切除后的標(biāo)本和20例非癲癇患者顳葉組織的標(biāo)本,兩者性別年齡無差異。
2.動物:將成年雄性SD大鼠建立氯化鋰-匹羅卡品模型后,隨機分為正常對照組與癲癇模型組,其中癲癇模型組分為6個亞組(1d,3d,1w,2w,1m,2m)。
2、> 3.分別用免疫熒光技術(shù),免疫組化技術(shù),實時熒光定量PCR,western blot技術(shù)檢測MEF2A的表達(dá)水平。
結(jié)果:
1.免疫熒光結(jié)果顯示:在人與大鼠神經(jīng)元中,MEF2A蛋白均僅在神經(jīng)元的胞核表達(dá),在神經(jīng)元樹突及星形膠質(zhì)細(xì)胞中無表達(dá)。
2.免疫組化結(jié)果顯示:MEF2A表達(dá)于人與大鼠神經(jīng)元的胞核中,且對照組MEF2A陽性表達(dá)強于癲癇組。
3.熒光定量 PCR結(jié)果顯示:難治性癲癇患者顳葉腦組
3、織中的 MEF2A mRNA的表達(dá)明顯低于 MEF2A mRNA在非癲癇患者腦組織中的表達(dá)(P<0.05);MEF2AmRNA表達(dá)在癲癇動物模型中點燃后的1d,3d,1w,2w,1m,2m與對照組相比均顯著降低(P<0.05),其表達(dá)最低值出現(xiàn)在7d。
4.蛋白免疫印跡結(jié)果顯示:與非癲癇患者腦組織比較,MEF2A表達(dá)在難治性癲癇患者顳葉腦組織中均明顯降低(P<0.05);MEF2A表達(dá)在癲癇動物模型中點燃后的1d,3d,1w,
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