熒光原位雜交技術體系的建立及其在檢測8號染色體數目異常及bcr-abl融合基因中的應用.pdf

1、山西醫(yī)科大學博士學位論文熒光原位雜交技術體系的建立及其在檢測8號染色體數目異常及bcrabl融合基因中的應用姓名：王慧萍申請學位級別：博士專業(yè)：內科血液學指導教師：喬振華王宏偉20040508山西醫(yī)科大學博士學位論文第一部分聯(lián)合應用細胞遺傳學、巢式RTPCR和FIsH技術檢測慢性髓系白血病患者的腫瘤負荷摘要目的探討常規(guī)細胞遺傳學(conventionalcytogeneties，CC)、巢式逆轉錄一聚合酶鏈反應(nested—rever

2、setranscriptasepolymerasechainreaction，nested—RT—PCR)及雙色雙融合熒光原位雜交(dual—coloranddual—fusionfluorescenceinsituhybridization，D—FISH)三種技術監(jiān)測慢性髓性白血病(chroniCmyeloidleukemia，CML)患者治療過程中腫瘤負荷的靈敏度和特異性。方j法聯(lián)合應用cc、巢式RT—PCR和DFISH三種技術對1

3、2例治療中CML患者的腫瘤負荷水平進行檢測。結果對5例INF—a治療的CML患者治療前后的24份骨髓標本檢測顯示，23份標本檢出不同比率的Ph染色體，所有標本RT～PCR檢測結果均為陽性。1份Ph(一)bcr／abl()標本(取自病例2INF—a。治療后75個月)經FISH檢測發(fā)現仍有45％的bcr／abl()細胞；對三組經cc檢測Ph染色體陽性率相同的標本(分別取自病例l治療后22個月、26個月，病例5治療后12個月、16個月及病例4

4、治療后6個月、10個月)，進一步行FISH檢測，分別檢出475％和395％、740％和605％、99o％和995％的bcr／abl()細胞。對7例非清髓性異基因造血干細胞移植治療的CML患者治療前后的40份骨髓標本檢測顯示，29份標本檢出不同比率的Ph染色體，3份因細胞數少CC分析失敗。36份標本RT—PCR檢測結果為陽性，4份標本(取自病例6移植后12個月、18個月、26個月、38個月)Ph染色體及RT—PCR結果均為陰性。4份Ph(

5、～)bcr／abl()標本(分別取自病例6移植后9個月、10個月、病例7移植后15個月及病例8移植后12個月)，經FISH檢測分別檢出54％、O％、165％及15％的bcr／abl()細胞。3份因細胞數少Cc核型分析失敗的標本(取自病例10移植后20天、60天、病例12移植后40天)，經FISH檢測bcr／abl()細胞檢出率分別為550％、275％和735％。1份Ph(一)bcr／abl(一)標本(取自病例6移植后12個月)FISH檢