基于血清藥物化學(xué)的逍遙散抗抑郁有效部位藥代動(dòng)力學(xué)初探.pdf

1、選題依據(jù):抑郁癥為一種常見的精神疾病，預(yù)測其到2020年將要成為世界第二大致殘性疾病，受到眾多醫(yī)藥工作者的重視。因現(xiàn)有的西藥具有復(fù)發(fā)率高和副作用大等問題，從中藥中研發(fā)理想的抗抑郁藥就成為研究熱點(diǎn)。逍遙散作為傳統(tǒng)的抗抑郁名方為眾多研究者的首選，但其抗抑郁物質(zhì)基礎(chǔ)、藥物在體內(nèi)代謝特征及作用機(jī)理均不明確。本課題組前期研究已經(jīng)明確了逍遙散中石油醚部位具有抗抑郁活性，但是有效部位進(jìn)入生物體內(nèi)后有哪些化學(xué)成分在治療作用、它們之間是否有協(xié)調(diào)作用、又是

2、怎樣協(xié)調(diào)發(fā)揮作用來改善機(jī)體的狀態(tài)、藥物的作用機(jī)制及其體內(nèi)動(dòng)態(tài)變化規(guī)律等問題都不清楚，所以對逍遙散石油醚部位進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)的研究成為必不可少的研究內(nèi)容。
　　目的:通過逍遙散抗抑郁有效部位的血清藥物化學(xué)方法，找出血清中移行成分，對其藥代動(dòng)力學(xué)特征進(jìn)行初步摸索，為下一步逍遙散藥動(dòng)學(xué)-藥效學(xué)相關(guān)性探索以及逍遙散臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:首先，采用逍遙散抗抑郁有效部位的體外模擬血清樣品，建立血清藥物化學(xué)的分析方法與樣品處

3、理方法;再對給藥途徑、給藥劑量和藥物溶媒等因素優(yōu)化，進(jìn)行血清藥物化學(xué)研究，查找血與組織中移行成分;然后，通過與對照品保留時(shí)間、紫外掃描圖譜比較，并參考文獻(xiàn)，對口服逍遙散石油醚部位后血中移行成分進(jìn)行歸屬與指認(rèn);針對對照品不易獲得的目標(biāo)成分采用傳統(tǒng)的植化方法制備，并進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定;最后，根據(jù)前期研究確定目標(biāo)藥效成分，并考察灌胃給予大鼠逍遙散石油醚部位后其藥代動(dòng)力學(xué)行為，進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)研究。
　　結(jié)果:1.采用逍遙散抗抑郁有效部位的體外模擬血

4、清樣品，比較了用不同溶劑進(jìn)行蛋白沉淀法與液液萃取法處理的血清樣品處理方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)利用乙醚:異丙醇(95∶5)+10％HCl萃取法萃取率最高，平均回收率可達(dá)81.96％。
　　2.灌胃給予大鼠逍遙散石油醚部位后對其血中移行成分進(jìn)行研究，在血清中發(fā)現(xiàn)了11個(gè)血中移行成分，其中8個(gè)成分是來自復(fù)方逍遙散石油醚部位的原型，且歸屬于柴胡、甘草和當(dāng)歸，指認(rèn)出2種化合物，分別為2，8，10-十五烷三烯-4，6-二炔-1-醇(CH-1)和2，8，

5、10-十五烷三烯-4，6-二炔-1-醇-乙酯(CH-2)，均源自柴胡藥材，其他3個(gè)移行成分則可能是原型成分給藥后在體內(nèi)經(jīng)代謝產(chǎn)生的代謝物;對尾靜脈注射后心臟、肝臟和腦組織中移行成分進(jìn)行分析，結(jié)果均發(fā)現(xiàn)13個(gè)分布成分，其中12個(gè)成分為原型，歸屬于柴胡、當(dāng)歸和白術(shù)，另1個(gè)推測為代謝物，指認(rèn)出其中4種化合物，分別為CH-1、CH-2、藁本內(nèi)酯和白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ。血清與組織中均指認(rèn)出源自君藥柴胡的化合物CH-1和CH-2在體內(nèi)穩(wěn)定存在，推測為藥效成分

6、，因此以其為目標(biāo)進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)研究。
　　3.建立了同時(shí)測定血清中CH-1和CH-2的測定方法，并進(jìn)行了嚴(yán)格的方法學(xué)考察，CH-1和CH-2的線性范圍分別為0.67μg/ml～201μg/ml和0.55μg/ml～165μg/ml，最低定量限(LLOQ)分別為標(biāo)準(zhǔn)曲線最低點(diǎn)0.67μg/ml和0.55μg/ml，該方法簡單穩(wěn)定、準(zhǔn)確可靠，可用于其藥代動(dòng)力學(xué)研究。灌胃給予大鼠3個(gè)不同劑量的逍遙散石油醚部位后，不同時(shí)間點(diǎn)采血并測定其血

7、藥濃度，并利用DAS3.0對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)CH-1和CH-2化合物血藥濃度-時(shí)間曲線具有雙峰現(xiàn)象，吸收快(Cmax分別為0.75～0.79h和0.71～1.0h)、消除慢(t1/2β較大分別為17～35h和20～29h)、在大鼠體內(nèi)兩者都符合二室模型的特點(diǎn)。給予3個(gè)劑量逍遙散石油醚部位后，通過比較其藥動(dòng)參數(shù)AUC(0～∞)和Cmax值，化合物CH-1、CH-2的體內(nèi)吸收和給藥劑量之間并不存在線性關(guān)系。
　　結(jié)論:1.本