替諾福韋陽離子脂質體的制備和細胞攝取研究.pdf

1、替諾福韋為核苷類藥物，具有較強抗HIV，HBV活性。為提高替諾福韋的療效，降低腎毒性，本課題采用一種新穎的方法制備替諾福韋脂質體，以掩蓋其負電性，提高生物利用度。迄今為止，國內外尚未見到有關替諾福韋脂質復合物的研究報道。 在課題中，我們采用薄膜水合法制備空白脂質體，用擠壓法控制粒徑。緩慢滴加適量乙醇，隨后滴加替諾福韋溶液，共孵育后透析除去乙醇。建立了高效液相測定脂質體及水相溶液中替諾福韋含量的方法，用Sephadex凝膠柱過濾法

2、分離替諾福韋脂質體和游離替諾福韋，測定包封率。此法簡便、選擇性強、重現(xiàn)性好。以包封率為主要指標，對不同處方和制備方法進行評價。對影響包封率較大的因素進行單因素分析，篩選出最佳處方為藥脂比0.03，脂質處方DSPC:CHOL:DMTAP: Cerebrosides: DSPE-PEG（6:3:2:1:0.5，摩爾比），包封率為86.05±2.20％。用PCS儀測定粒徑分布及表面電位，其平均粒徑為278.4±67.6nm，多分散系數(shù)為0.1

3、17-0.350，Zeta 電位為 31±5mv。脂質體在4℃HEPES緩沖體系保存穩(wěn)定性超過五周。 進一步地，我們嘗試在脂質體處方中加入半乳糖基及PEG修飾的脂質，以SMMC7721細胞為模型，研究脂質體處方對肝實質細胞攝取替諾福韋的促進作用。建立了液相質譜聯(lián)用檢測細胞樣品中替諾福韋含量的方法，方法靈敏度高，快速。結果表明，修飾的脂質體處方較游離藥物進入肝細胞的濃度明顯提高，且時間延長，說明替諾福韋脂質體具有一定的長循環(huán)性和靶