鹽酸拓?fù)涮婵抵|(zhì)體的制備及體內(nèi)外評(píng)價(jià).pdf

1、鹽酸拓?fù)涮婵?Topotecan，TPT)是喜樹(shù)堿的一種半合成衍生物，具有良好的水溶性以及抗腫瘤活性。作為拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，其結(jié)構(gòu)中的內(nèi)酯環(huán)與藥理作用密切相關(guān)。與其他拓?fù)洚悩?gòu)酶酶抑制劑一樣，TPT的內(nèi)環(huán)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性與pH值有關(guān)，在pH較高的條件下會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)轸人猁}形式，從而失去活性。將藥物與大分子藥物載體通過(guò)共價(jià)鍵或者非共價(jià)鍵結(jié)合后可以有效增加內(nèi)酯環(huán)穩(wěn)定性。脂質(zhì)體作為藥物傳遞與釋放載體，可以有效地提高藥物穩(wěn)定性、對(duì)藥物有緩釋作用，同時(shí)脂質(zhì)體制

2、劑還具有一定的靶向性，可以增加細(xì)胞對(duì)藥物的攝取，提高藥效。本文采用硫酸銨梯度法制備了鹽酸拓?fù)涮婵甸L(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體，從體內(nèi)、體外等方面對(duì)脂質(zhì)體制劑進(jìn)行了評(píng)價(jià)，考察了脂質(zhì)體制劑對(duì)藥物穩(wěn)定性、細(xì)胞毒性、藥動(dòng)學(xué)以及組織分布方面的改進(jìn)。
　　本文分別采用HPLC方法以及凝膠色譜法用來(lái)測(cè)定脂質(zhì)體制劑的藥物含量以及包封率，并對(duì)建立的方法進(jìn)行了考察，表明所建立的方法能夠準(zhǔn)確地測(cè)定鹽酸拓?fù)涮婵抵|(zhì)體中藥物的含量以及包封率。
　　以氫化磷脂(HSP

3、C)、膽固醇以及聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)為材料，采用硫酸銨梯度法制備TPT脂質(zhì)體，以包封率為考察指標(biāo)，對(duì)制備脂質(zhì)體的處方以及工藝進(jìn)行優(yōu)化以及篩選，包括磷脂與膽固醇比例、藥物與磷脂比例、硫酸銨濃度、空白脂質(zhì)體粒徑大小以及水浴孵育時(shí)間和溫度，從而確定最佳的處方以及制備工藝。
　　對(duì)制備的脂質(zhì)體制劑的外觀、粒徑分布及均勻度、制劑在體外的釋放以及在不同稀釋液中穩(wěn)定性進(jìn)行了考察。脂質(zhì)體的平均粒徑為69.63±5.3

4、3 nm;多分散指數(shù)為0.117;平均包封率為93.14±1.52％;體外需要144h才能完全釋放出來(lái)，表明具有明顯的緩釋作用;初步穩(wěn)定性表明，TPT脂質(zhì)體在4℃條件下放置3個(gè)月的穩(wěn)定性良好，含量、有關(guān)物質(zhì)、包封率、粒徑分布及pH值均無(wú)明顯改變。
　　體外細(xì)胞毒性表明鹽酸拓?fù)涮婵抵|(zhì)體以及游離藥物高濃度時(shí)對(duì)A549細(xì)胞有生長(zhǎng)抑制作用，脂質(zhì)體的細(xì)胞毒性稍?xún)?yōu)于游離藥物，其IG0值分別為18.22和31.25μg·mL-1，同時(shí)，從細(xì)胞

5、凋亡、周期、壞死等方面對(duì)鹽酸拓?fù)涮婵抵|(zhì)體的作用機(jī)理進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，脂質(zhì)體制劑能夠促進(jìn)細(xì)胞的凋亡和壞死，將細(xì)胞阻滯在S期和G2/M期。
　　體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)及組織分布表明，鹽酸拓?fù)涮婵翟趧?dòng)物體內(nèi)沒(méi)有蓄積作用，與游離藥物相比，脂質(zhì)體制劑顯著增加了藥物在血液中的循環(huán)時(shí)間，血漿AUC是游離組的61.17倍，同時(shí)，脂質(zhì)體制劑還改變了藥物在小鼠體內(nèi)的分布情況，通過(guò)PEG修飾，減低了肝臟、脾臟對(duì)藥物的攝取，在肺部的聚集量增加，顯示具有一定的肺