陽離子脂質(zhì)體微泡超聲造影劑的制備及體外基因轉(zhuǎn)染初步研究.pdf

1、目的:制備一種常規(guī)超聲可實(shí)時(shí)觀測的陽離子脂質(zhì)體微泡超聲造影劑，提供一個(gè)可實(shí)時(shí)觀測的載體，從而為攜基因微泡聯(lián)合超聲靶向治療提供一定的技術(shù)支持。
　　 方法:選用二軟脂酰卵磷脂（DPPC）、1，2-二油烯氧基-3-三甲氨基丙烷（DOTAP）和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（DSPE-PEG2000）三種脂質(zhì)，以一定比例混合，使用薄膜分散法制備脂質(zhì)體微泡超聲造影劑。在光鏡下觀察微泡形態(tài)，使用激光粒徑儀檢測微泡粒徑分布，同時(shí)使用

2、醫(yī)用超聲診斷儀對(duì)其體內(nèi)外顯影效果進(jìn)行觀察。體內(nèi)顯影效果與商用超聲造影劑（聲諾維）進(jìn)行對(duì)比，觀察其差異。通過DNA凝膠電泳實(shí)驗(yàn)檢測自制脂質(zhì)體微泡攜帶pGL3-control基因的能力，并對(duì)其體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染效果進(jìn)行初步分析。
　　 結(jié)果:以一定比例混合DPPC、DOTAP和DSPE-PEG2000為主要材料制備出的脂質(zhì)體微泡的平均粒徑為6.969μm。超聲造影劑體內(nèi)外顯影效果良好,體內(nèi)大動(dòng)脈顯影持續(xù)時(shí)間與聲諾維相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0

3、.05）。DNA凝膠電泳實(shí)驗(yàn)顯示自制陽離子脂質(zhì)體微泡超聲造影劑有著較好的攜帶pGL3-control基因的能力，且攜帶能力明顯好于聲諾維，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)聲諾維攜帶pGL3-control基因能力很弱。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)自制脂質(zhì)體微泡明顯提高了pGL3-control在COS-7細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)染效率（p<0.01）。
　　 結(jié)論:自制陽離子脂質(zhì)體微泡超聲造影劑具有良好的顯影及攜帶pGL3-control基因的能力，可以實(shí)現(xiàn)常規(guī)超聲下大動(dòng)脈內(nèi)