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1、目的:觀察人體不同解剖部位正常皮膚組織和不同時(shí)期瘢痕組織神經(jīng)的構(gòu)筑情況,比較瘢痕和正常皮膚的神經(jīng)構(gòu)筑規(guī)律,探尋神經(jīng)在創(chuàng)傷愈合和瘢痕轉(zhuǎn)歸中的作用。 方法:將研究對(duì)象分為A、B、C、D三組:A組為正常皮膚組,正常皮膚標(biāo)本取自死后6h內(nèi)的成年尸體(累及皮膚及周?chē)窠?jīng)疾病的除外),每具尸體分別從面部、胸部、腹部、大腿前側(cè)、膝外側(cè)、小腿中部外側(cè)6個(gè)解剖部位各取一份標(biāo)本,共30份;B組增生期瘢痕,C組成熟期瘢痕,瘢痕組織標(biāo)本來(lái)于住院瘢痕患者
2、手術(shù)切除物,總計(jì)62例與正常皮膚標(biāo)本相對(duì)應(yīng)解剖部位的組織,D組為5例瘢痕疙瘩,組織來(lái)自1999年至2003年省立醫(yī)院門(mén)診或者住院病人。每份標(biāo)本分成兩小份,分別用10%中性甲醛和液氮固定、保存,行石蠟、冰凍切片連續(xù)切片,厚度10~15um。分別做HE染色,和綿羊抗人蛋白基因產(chǎn)物PGP9.5免疫組織化學(xué)染色,封片固定后,光鏡下觀察,統(tǒng)一放大倍數(shù)(×20)用Olympus-Bx50顯微鏡采集圖像,結(jié)果用捷達(dá)圖形分析軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果
3、: 神經(jīng)軸突經(jīng)染色后,鏡下顯示為棕黃色纖維。由于神經(jīng)截面的不同,鏡下呈現(xiàn)為圓形、橢圓形、條紋形、條帶狀或者樹(shù)枝樣棕黃色圖形,形態(tài)多樣。 正常皮膚神經(jīng)構(gòu)筑的密度為60.8±14.7每單位面積。各部位中,面部神經(jīng)數(shù)目最多90.6±17.97,顯著多于其他部位,其它部位之間沒(méi)有顯著差異。正常皮膚神經(jīng)的分布存在立體性特點(diǎn):主要分布層次:表皮、真皮乳頭層、網(wǎng)狀層及其中的各種附件、皮下組織。真皮乳頭層神經(jīng)顯示為細(xì)小的棕黃色圓點(diǎn),比較
4、密集,差異不甚明顯。網(wǎng)狀層神經(jīng)可以見(jiàn)到比較粗大的樹(shù)枝狀神經(jīng)束,以胸部(正中線附近)最粗,其他部位相對(duì)較細(xì);大腿較粗的皮神經(jīng)相對(duì)比較表淺。毛囊神經(jīng)在基底部分布較多,較為纖細(xì),不以束狀走行。皮脂腺周?chē)窠?jīng)纖維多平行排列。 瘢痕的組織成份主要為膠原纖維、纖維母細(xì)胞。膠原纖維增生顯著,排列紊亂,有的區(qū)域排列成旋渦狀。纖維內(nèi)血管少,而在其外周則呈網(wǎng)狀包繞。表皮結(jié)構(gòu)菲薄,沒(méi)有毛囊和腺體等皮膚附件。大多數(shù)真皮乳頭層消失,少數(shù)比較密集。瘢痕的神
5、經(jīng)構(gòu)筑分布不規(guī)律,神經(jīng)數(shù)目最高的可達(dá)每單位面積可達(dá)160個(gè)。少的地方幾乎沒(méi)有陽(yáng)性顯示。 增生期瘢痕,膠原豐富,細(xì)小血管密布。神經(jīng)纖維纖細(xì)、密集,單位面積數(shù)目94.28±6.39。面部增生期瘢痕96.3±13。表淺層比深層構(gòu)筑少。皮下神經(jīng)構(gòu)筑與正常皮膚比較沒(méi)有明顯差異。 成熟期瘢痕的膠原比增生期排列規(guī)則,血管亦比較豐富,神經(jīng)陽(yáng)性染色數(shù)目40.48±6.14,面部為41.14±16。 瘢痕內(nèi)神經(jīng)的數(shù)目與年齡沒(méi)有表現(xiàn)出
6、相關(guān)性,其數(shù)目的變化與瘢痕的自身發(fā)展有關(guān)系,但瘢痕的神經(jīng)構(gòu)筑隨著時(shí)間表現(xiàn)出下降趨勢(shì)。 本實(shí)驗(yàn)5例瘢痕疙瘩組織的結(jié)果顯示,pgp9.5免疫陽(yáng)性神經(jīng)數(shù)目比較少,單位面積平均數(shù)目為48.2±18。 結(jié)論: 1.正常人皮膚的神經(jīng)分布呈現(xiàn)出立體性,從皮膚深層發(fā)出各級(jí)分支。各解剖部位中,面部的神經(jīng)數(shù)目明顯比其它部位多。 2.增生期瘢痕的神經(jīng)密度比正常皮膚高,并且隨著時(shí)間的變化呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì),而成熟期瘢痕神經(jīng)卻比較少
7、,這也驗(yàn)證神經(jīng)參與了創(chuàng)傷愈合過(guò)程,并與瘢痕的專(zhuān)歸有關(guān)系。對(duì)創(chuàng)面(燒傷殘余創(chuàng)面、瘢痕潰瘍、褥瘡等)通過(guò)局部神經(jīng)或者神經(jīng)肽進(jìn)行干預(yù),可能是促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的一個(gè)新思路。 3.年齡增生期瘢痕和成熟期瘢痕的神經(jīng)與年齡沒(méi)有相關(guān)性,而是與創(chuàng)傷愈合和瘢痕自身發(fā)展有關(guān)。 4.胞漿蛋白PGP9.5,作為全軸突標(biāo)記物可以較好的顯示細(xì)小皮神經(jīng)。同時(shí)基底層黑色素對(duì)染色造成干擾,需要尋求一種能夠去除色素而對(duì)抗原性影響較小的處理色素技術(shù),或者更理想的顯
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