獨活寄生湯對Hartley豚鼠椎間盤退變干預(yù)的研究.pdf

1、研究背景：
　　 由椎間盤退變(Intervertebral disc degeneration,IVDD)造成的頸、腰椎疾病日益構(gòu)成對人民健康的威脅,并嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。IVDD是一個漫長而不可逆的過程,因此,IVDD機(jī)制的研究,對于從根本上防止頸、腰椎疾病的發(fā)生具有重要意義。從不同角度對IVDD機(jī)制的研究一直是國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點。每一個對IVDD機(jī)制的新認(rèn)識,都是開發(fā)治療IVDD新途徑的前提和基礎(chǔ)。
　　 動物

2、模型是研究IVDD發(fā)生機(jī)制和檢測各種治療有效性的一種可靠手段,建立一種可靠的IVDD動物模型將為研究IVDD發(fā)病機(jī)制提供有利的條件,同時為修復(fù)退變椎間盤的各種治療探索研究提供良好的實驗載體。
　　 中醫(yī)藥在治療IVDD方面已經(jīng)體現(xiàn)出了優(yōu)勢,因此是否可以應(yīng)用現(xiàn)代技術(shù)手段通過中藥對IVDD作用機(jī)理進(jìn)行研究是一個值得深入探討的問題,展開中醫(yī)藥防治IVDD的實驗研究,為深化中醫(yī)藥延緩IvDD研究奠定更加堅實的基礎(chǔ)。
　　 本實驗

3、旨在通過獨活寄生湯對預(yù)防雌性Hartley豚鼠自然增齡過程中IVDD的干預(yù)作用,進(jìn)行從分子生物學(xué)水平的相關(guān)機(jī)理的探索,從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)角度為中醫(yī)藥預(yù)防IVDD提供更為科學(xué)的理論和實驗依據(jù)。
　　 研究目的：
　　 本實驗通過對雌性Hartley豚鼠腰椎間盤自然老化退變的模型,觀察各月齡組豚鼠腰椎間盤的形態(tài)學(xué)變化、血生化變化,建立一種可靠的腰IVDD動物模型。利用該模型觀察獨活寄生湯對椎間盤髓核金屬蛋白酶及其炎性誘導(dǎo)因子和蛋白多

4、糖(proteoglycan,PG)降解的影響,初步探討?yīng)毣罴纳鷾珜artley豚鼠IVDD的作用機(jī)理。
　　 研究方法：
　　 選用1月齡雌性Hartley豚鼠104只,按月齡隨機(jī)分為正常組、模型組、治療組(獨活寄生湯)、陽性對照組(鹽酸氨基葡萄糖膠囊)4組,每組8只。取腰椎間盤L4—5進(jìn)行HE、番紅-0/固綠、Mallory染色,觀察椎間盤髓核形態(tài)學(xué)變化,檢測各組標(biāo)本血清中PG含量的變化。免疫組織化學(xué)染色檢測椎間盤

5、髓核中IL-1β、TNF-α、MMP-1、MMP-3表達(dá)的OD值變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.組織形態(tài)學(xué):從HE、番紅-0/固綠及Mallory染色染色標(biāo)本觀察,隨月齡增長形態(tài)變化明顯。與正常組比較,模型組椎間盤脊索細(xì)胞數(shù)目明顯減少,髓核向心性皺縮、纖維軟骨化,軟骨終板變薄。
　　 2.血生化水平:血清PG Elisa檢測結(jié)果顯示模型組血清PG含量隨年齡的增長而下降,且不同月齡組間差異顯著。治療組和陽性對照組血

6、清PG下降程度較模型組輕,尤以治療組血清PG含量最高。
　　 3.分子水平:通過免疫組織化學(xué)染色的方法,觀察基質(zhì)金屬蛋白酶MMP—1、MMP-3及其誘導(dǎo)因子IL—1β、TNF-α在退變椎間盤組織中的表達(dá)及變化,可見隨年齡的增長而下降,不同月齡組間差異顯著,模型組、中藥組、西藥組的表達(dá)均較正常組模型升高有顯著性差異,且模型組更為明顯。
　　 結(jié)論：
　　 1利用雌性Hartley豚鼠自然老化退變模型,可以觀察到椎間