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文檔簡介
1、目的:研究不飽和脂肪酸制劑魚肝油酸鈉對體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞的抗腫瘤作用及其機(jī)理;進(jìn)一步闡明經(jīng)皮瘤內(nèi)注射魚肝油酸鈉治療裸鼠皮下移植肝癌的效果和機(jī)理,明確該藥有無骨髓抑制及肝腎功能損傷等副作用.方法:1.選取不同濃度魚肝油酸鈉(200μg/ml、100μg/ml、50μg/ml和25μg/ml)作用于體外培養(yǎng)BEL-7402人肝癌細(xì)胞,分別于加藥24、48、72小時(shí)后進(jìn)行酸性磷酸酶法檢測細(xì)胞活性,測定吸光度值(OD值);另以100μg/ml魚肝
2、油酸鈉作用12小時(shí)后,用Annexin-v-FITC試劑盒標(biāo)記凋亡細(xì)胞,進(jìn)行流式細(xì)胞分析計(jì)數(shù)早期凋亡細(xì)胞;或應(yīng)用甲基綠哌洛寧馬休黃(MG-P-MY)組合法進(jìn)行凋亡細(xì)胞染色,并用多功能真彩色計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)(CMIAS)計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞.以培養(yǎng)液和原代培養(yǎng)人成纖維細(xì)胞作為空白對照和細(xì)胞對照.2. 5周齡裸鼠28只,雌雄各半,于裸鼠的右腋后皮下植入SMMC-7721人肝癌組織塊(0.2×0.2×0.2cm<'3>).兩周后,全部接種部位腫瘤最
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