內(nèi)皮分化基因受體介導(dǎo)溶血磷脂酸在胰腺癌臨床診療價(jià)值的評(píng)價(jià).pdf

1、研究背景：
　　胰腺癌是消化系統(tǒng)腫瘤中常見的惡性腫瘤之一;因臨床發(fā)現(xiàn)時(shí)多為胰腺癌中晚期，治療效果有限，預(yù)后極差。因此，早期診斷、早期治療對(duì)于延長生存期，提高生存質(zhì)量有著至關(guān)重要的作用。
　　溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid，LPA)是一種對(duì)多種細(xì)胞具有不同生物學(xué)活性作用的磷脂介質(zhì)，在組織中廣泛存在。LPA曾被認(rèn)為是生物膜磷脂代謝過程中所產(chǎn)生的一種惰性產(chǎn)物，現(xiàn)在人們逐漸認(rèn)識(shí)到，LPA作為一種重要的信號(hào)分子

2、，像許多其他生物遞質(zhì)一樣，通過特定的細(xì)胞表面G蛋白耦合受體(Gprotein-coupled receptor，GPCR)與細(xì)胞相互作用，并影響細(xì)胞的功能，諸如細(xì)胞增殖、細(xì)胞存活、細(xì)胞骨架形成以及細(xì)胞鈣離子流動(dòng)等。GPCR受體也稱LPA受體，最常見的LPA受體有Edg-2/LPA1、Edg-4/LPA2和Edg-7/LPA3，該類受體又被命名為內(nèi)皮分化基因(endothelial differentiation gene，Edg)或溶血

3、磷脂受體亞族（subfamily of lysophospholipid receptor, sLP）。LPA對(duì)人胰腺癌可誘導(dǎo)產(chǎn)生包括細(xì)胞增殖、遷徙等生物學(xué)效應(yīng)。LPA分泌量的增加，可能是常見惡性腫瘤細(xì)胞癌變過程中的步驟之一，如LPA通過上調(diào)卵巢癌組織中VEGF的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤血管生成，從而間接促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。LPA能促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metal loproteinases， MMP)和腫瘤血管生成因子的分泌，和腫

4、瘤的發(fā)展有關(guān)。與LPA合成分解代謝相關(guān)的血小板衍生生長因子(platelet derivedgrowth factor， PDGF)和MMP在人胰腺癌的侵襲、轉(zhuǎn)移過程中起重要作用。
　　因此檢測胰腺癌患者血漿溶血磷脂酸(lysphosphaticlic acid，LPA)含量的變化，評(píng)價(jià)LPA水平的測定在胰腺癌患者診治中的臨床意義;進(jìn)一步探討胰腺癌標(biāo)本及其癌旁組織中內(nèi)皮分化基因受體LPA1、LPA2和LPA3表達(dá)的變化與胰腺癌臨床

5、病理特征、生物學(xué)行為的關(guān)系。
　　方法：
　　采用定磷法檢測胰腺癌及健康體檢志愿者的血漿LPA水平，同時(shí)測定血清CA19-9、AFP和CEA的水平，分析檢測數(shù)據(jù)與臨床病理特征的相關(guān)性;進(jìn)一步用免疫組化、RT-PCR、IHC和Western blot方法檢測胰腺癌組織及癌旁對(duì)照胰腺組織LPA受體的表達(dá)，與病理改變（瘤體大小、病理類型、臨床分期、CA19-9、包膜侵犯和淋巴結(jié)受累等）行相關(guān)性分析，并評(píng)價(jià)臨床價(jià)值。
　　結(jié)果

6、：
　　胰腺癌患者血漿LPA水平明顯高于胰腺良性疾病患者和健康志愿者[(4.10±2.03)vs(3.28±1.26)、(2.27±1.02)μmol/L，P＜0.05]。胰腺癌患者血漿LPA濃度的改變和血清CA19-9水平變化密切相關(guān)(r=0.9070，P＜0.01)。血漿LPA水平的升高與局部包膜浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理改變相關(guān)。免疫組化檢測結(jié)果顯示，癌旁對(duì)照胰腺組織少部分上皮細(xì)胞胞質(zhì)有輕微染色，陽性率為4％(2/50);胰

7、腺癌組織中LPA2染色信號(hào)較強(qiáng)，廣泛分布于癌細(xì)胞的胞質(zhì)和胞膜，但細(xì)胞核無染色信號(hào)，陽性率為88％(44/50)。Western blot檢測結(jié)果顯示:胰腺癌組織LPA2受體的表達(dá)水平顯著高于癌旁組織;而LPA1和LPA3受體表達(dá)與癌旁組織無明顯差別。RT-PCR結(jié)果:針對(duì)各LPA受體mRNA相對(duì)GAPDH表達(dá)水平進(jìn)行了定量評(píng)價(jià)，LPA1≈LPA3＜LPA2。LPA1、LPA3、LPA2受體mRNA表達(dá)量分別為(0.142±0.042)％

8、、(0.471±0.064)％、(0.231±0.043)％，高于對(duì)應(yīng)癌旁正常胰腺組織分別為(0.132±0.029)％、(0.027±0.015)％、(0.163±0.046)％，50例胰腺癌患者癌組織LPA2受體mRNA的表達(dá)含量較對(duì)照癌旁組織顯著升高(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:在人胰腺癌組織LPA2受體的表達(dá)，與癌旁對(duì)照胰腺組織不同，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異，提示與腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展存在一定的關(guān)系。
　　結(jié)論：
　　血漿L

9、PA檢測為臨床胰腺癌診斷、轉(zhuǎn)移和預(yù)后判斷增加了一項(xiàng)潛在評(píng)價(jià)指標(biāo);LPA受體有望成為新的檢測胰腺癌的生物標(biāo)志，LPA2受體也是臨床胰腺癌潛在靶向目標(biāo)的又一選擇。內(nèi)皮分化基因受體Edg介導(dǎo)溶血磷脂酸LPA在胰腺癌組織中高表達(dá)，其高表達(dá)反映出腫瘤的局部侵襲力增強(qiáng)和較早發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，Edg受體介導(dǎo)LPA高表達(dá)可能在促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞增殖、分化、轉(zhuǎn)移過程發(fā)揮一種重要作用，通過改變LPA受體的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控Edg/LPA受體介導(dǎo)LPA的最終生物學(xué)效應(yīng)，