TLR4與相關炎癥因子在高血壓腎損傷中的作用研究.pdf

1、目的: 觀察血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)刺激大鼠腎小管上皮細胞(NRK-52E)后Toll樣受體4(TLR4)、NF-κB、IL-6、TNF-a的表達變化，初步探討AngⅡ對NRK-52E中TLR4及相關炎癥分子表達的影響。 方法: ①大鼠腎小管上皮細胞(NRK-52E)分別按AngⅡ濃度梯度0(正常對照組)、10-6M、10-7M、10-8M、10-9M、10-10M培養(yǎng)24h，采用逆轉錄-多聚酶鏈反應(RT-PC

2、R)方法檢測TLR4 mRNA表達水平。 ②根據(jù)①實驗結果選擇最佳AngⅡ干預濃度按時間梯度0(正常對照組)、6h、12h、24h、48h分組培養(yǎng)NRK-52E。RT-PCR檢測TLR4mRNA表達水平，選擇最佳AngⅡ干預時間點。 ③根據(jù)①②實驗結果選擇最佳AngⅡ干預濃度培養(yǎng)NRK-52E至最佳時間點，采用免疫細胞化學法檢測NF-kB核易位活化情況，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測NRK-52E上清中IL-6、TNF

3、-a的表達水平。 結果: ①AngⅡ上調NRK-52E中TLR4mRNA的表達呈劑量依耐關系，在時效關系上，10-7MAngⅡ作用6h后TLR4mRNA即顯著增高，12h～24h維持高峰水平，而48h后TLR4mRNA表達逐漸減少。 ②10-7MAngⅡ作用NRK-52E24h后可明顯誘導NF-kB活化入核，NRK-52E上清中的IL-6、TNF-α分泌水平亦顯著增高。 結論: AngⅡ可誘導NR