Tiam1、DcR3、Kallikrein6在大腸癌中的表達及與外周血微轉(zhuǎn)移的關系.pdf

1、本研究分為三部分： 第一部分：大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移檢測的臨床意義 目的: 大腸癌是最常見的惡性腫瘤之一，血行轉(zhuǎn)移是大腸癌根治性手術失敗的主要原因之一，也是患者死亡的主要原因。在接受了根治術的患者中，仍有超過50％的患者最終死于腫瘤的復發(fā)和轉(zhuǎn)移，提示手術時可能已有大腸癌微轉(zhuǎn)移的存在。本研究以CK20 mRNA作為外周血中大腸癌細胞存在的特異性標志物，探討了大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移檢測的臨床意義，手術操作和外周血微轉(zhuǎn)移的關系

2、，以及大腸癌組織中微血管密度(microvessel density，MVD)和微淋巴管密度(lymphatic microvessel density，LMVD)與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的關系。 方法: 以CK20mRNA作為外周血中大腸癌細胞存在的特異性標志物，采用RT-PCR技術檢測大腸癌患者術前和術中外周血微轉(zhuǎn)移；采用免疫組織化學方法檢測大腸癌組織中MVD和LMVD；分析大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移、大腸癌組織中MVD和LMVD與

3、臨床病理參數(shù)的關系以及大腸癌組織中MVD和LMVD與外周血微轉(zhuǎn)移的關系。 結(jié)果: 51例大腸癌患者中18例手術前外周血CK20mRNA呈陽性表達，總陽性表達率為35.29％(18/51)，在Ⅰ～Ⅳ期患者中的陽性表達率分別為12.50％(1/8)、23.53％(4/17)、35.29％(6/17)和77.78％(7/9)，CK20mRNA在外周血中的陽性表達與TNM分期相關(P＜0.05)；手術中有21例呈陽性表達(21/51)，

4、3例術前陰性表達者術中轉(zhuǎn)為陽性表達，均為直腸癌手術患者；CK20mRNA在外周血中的陽性表達與患者的性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CEA值、腫瘤分化程度、浸潤深度無關(P＞0.05)，但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(P＜0.05)；MVD與患者的性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CEA值無關(P＞0.05)，但與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(P＜0.05)；LMVD與患者的性

5、別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CEA值、腫瘤分化程度、浸潤深度無關(P＞0.05)，但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(P＜0.01)；大腸癌患者外周血CK20mRNA陽性表達組MVD和LMVD的值分別為58.83±18.28和9.72±1.64，而外周血CK20mRNA陰性表達組MVD和LMVD的值分別為30.48±9.31和8.21±1.87，顯著低于陽性表達組(P＜0.01)。 結(jié)論: 大腸癌細胞外周血微轉(zhuǎn)

6、移是大腸癌的早期事件，外周血微轉(zhuǎn)移發(fā)生率隨臨床病理分期的增加而升高，外周血微轉(zhuǎn)移與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關，是反映大腸癌生物學行為的指標之一；手術操作有可能促進直腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移的發(fā)生；MVD與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關；LMVD與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關；大腸癌組織血管化程度和淋巴管生成與外周血微轉(zhuǎn)移密切相關，通過對二者的檢測有助于判斷外周血微轉(zhuǎn)移發(fā)生的情況。 第二

7、部分：Tiam1、DcR3在大腸癌中表達的臨床意義及與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的關系 目的: 侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要特征，也是腫瘤患者死亡的主要原因，因此對腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移及其相關基因的研究具有重要意義。T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導因子1(Tlymphoma invasion and metastasis factor 1，Tiam1)與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關。DcR3(decoy receptor 3)是腫瘤壞死因子受體超家族成員，在多

8、種人類惡性腫瘤中出現(xiàn)過度表達，且DcR3的表達狀態(tài)與惡性腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和病理分期密切相關。關于Tiam1和DcR3與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的研究報道不多，我們通過檢測Tiam1和DcR3在大腸癌組織和正常大腸粘膜組織中的表達，探討了Tiam1和DcR3表達與大腸癌臨床病理參數(shù)的關系以及二者與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的關系。 方法: 以CK20mRNA作為外周血中大腸癌細胞存在的特異性標志物，采用RT-PCR方法檢測大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移

9、；采用實時熒光定量RT-PCR方法檢測大腸癌組織和正常組織中Tiaml和DcR3的表達；分析大腸癌組織中Tiam1和DcR3表達與臨床病理參數(shù)以及患者外周血微轉(zhuǎn)移的關系。 結(jié)果: 51例大腸癌組織及正常粘膜組織中均見Tiam1mRNA表達，表達水平分別為(20.61±4.99)×10-4和(3.49±2.74)×10-4，大腸癌組織中Tiam1mRNA表達明顯高于正常組織(P＜0.01)；Tiam1mRNA在伴有外周血微轉(zhuǎn)移的大

10、腸癌組織中的表達水平為(72.11±2.38)×10-4，在不伴外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中的表達水平為(15.78±5.01)×10-4，二者差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；大腸癌組織中Tiam1mRNA表達水平與患者的性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CEA值無關(P＞0.05)，但與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(P＜0.05)；51例大腸癌組織及正常粘膜組織中均見DcR3mRNA的表達，表達

11、水平分別為(42.40±2.83)×10-4和(12.59±2.55)×10-4，大腸癌組織中DcR3mRNA表達明顯高于正常組織(P＜0.01)；DcR3mRNA在伴有外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中表達水平為(61.53±2.60)×10-4，在不伴外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中表達水平為(34.60±2.84)×10-4，但二者差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；DcR3mRNA的表達水平與患者的性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、腫瘤大小、外周血CE

12、A值無關(P＞0.05)，但與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(P＜0.05)。 結(jié)論: 大腸癌組織的Tiam1mRNA和DcR3mRNA高表達與大腸癌的發(fā)生相關；大腸癌組織的Tiam1mRNA和DcR3mRNA表達水平與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期相關；Tiam1mRNA高表達是大腸癌患者發(fā)生外周血微轉(zhuǎn)移的高危因素；但DcR3mRNA高表達不能作為大腸癌患者發(fā)生外周血微轉(zhuǎn)

13、移的高危因素。 第三部分：Kallikrein6在大腸癌中表達的臨床意義及與大腸癌外周血微轉(zhuǎn)移的關系 目的: 激肽釋放酶(Kallikreins，KLK)是一組分泌型絲氨酸蛋白酶，存在于多種組織和生物體液中。人KLK基因家族參與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展，多種KLK與前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌和睪丸癌等內(nèi)分泌相關腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關，是此類腫瘤的潛在標志物。KLK6異常表達與多種腫瘤相關。國內(nèi)目前未見有關KLK6和大腸癌關系的報

14、道。我們通過檢測KLK6mRNA在大腸癌組織和正常大腸粘膜組織中的表達，探討了KLK6表達與大腸癌臨床病理資料的關系及其與外周血微轉(zhuǎn)移的關系。 方法: 以CK20mRNA作為外周血中大腸癌細胞存在的特異性標志物，采用RT-PCR方法檢測大腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移；采用實時熒光定量RT-PCR方法檢測大腸癌組織和正常組織中KLK6的表達；分析大腸癌組織中KLK6表達與臨床病理參數(shù)以及患者外周血微轉(zhuǎn)移的關系。 結(jié)果: 51例大腸

15、癌組織及正常粘膜組織中均見KLK6mRNA的表達。大腸癌組織中和正常粘膜組織中KLK6mRNA表達水平分別為(33.11±2.34)×10-4和(12.88±2.51)×10-4，有高度統(tǒng)計學差異(P＜0.01)；伴有外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中和不伴外周血微轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中KLK6mRNA的表達水平分別為(40.64±2.05)×10-4和(30.06±2.45)×10-4，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；大腸癌組織的KLK6mRN