碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌的分子生物學(xué)及其臨床感染特征研究.pdf

1、細(xì)菌耐藥性目前己成為全球性關(guān)注的問(wèn)題,耐藥細(xì)菌所致感染已構(gòu)成新世紀(jì)抗感染治療的新挑戰(zhàn),是當(dāng)前人類健康和生命面臨的主要威脅。腸桿菌科細(xì)菌分布廣,與人類關(guān)系密切。在醫(yī)院感染中,腸桿菌科細(xì)菌包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等是引起醫(yī)院感染最常見的病原菌,并以多重耐藥菌株引起的感染為顯著特點(diǎn)。碳青霉烯類抗生素是目前臨床治療產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(Extended Spectrum β-Lactamases,ESBLs)及AmpC酶等多重耐藥菌株所引起

2、感染的最有效的抗菌藥。但隨著該類抗生素在臨床上的廣泛應(yīng)用及不合理使用,臨床上已出現(xiàn)對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥的菌株。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥機(jī)制報(bào)道主要集中在四個(gè)方面:
　?、佼a(chǎn)生碳青霉烯酶,如IMP型和VIM型金屬酶以及KPC(Klebsiella pneumoniae carbapenemase,KPC)型碳青霉烯酶等;
　?、贓SBL和/或AmpC酶過(guò)度表達(dá)同時(shí)合并外膜孔蛋白的丟失;
　　③

3、外排泵高表達(dá)的膜屏障機(jī)制;
　?、芩幬锇形桓淖?。
　　在上述幾種耐藥機(jī)制中,產(chǎn)碳青霉烯酶是腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類耐藥最主要的機(jī)制。駱俊等人對(duì)2003年6月到2004年5月華山醫(yī)院臨床分離的耐亞胺培南的革蘭陰性桿菌中的碳青霉烯酶進(jìn)行了篩查,發(fā)現(xiàn)細(xì)菌產(chǎn)碳青霉烯酶是不動(dòng)桿菌和弗勞地檸檬酸桿菌對(duì)亞胺培南和美羅培南等碳青霉烯類抗生素耐藥的主要原因之一。沈繼錄等人采用瓊脂稀釋法測(cè)定亞胺培南和美羅培南對(duì)199株革蘭陰性桿菌的最低抑菌濃度

4、(MIC),結(jié)果顯示耐碳青霉烯類革蘭陰性桿菌對(duì)12種抗生素的耐藥率均高于碳青霉烯類敏感革蘭陰性桿菌的耐藥率,而且產(chǎn)生多種碳青霉烯酶,如KPC、IMP、VIM和OXA型碳青霉烯酶等,并在弗勞地檸檬酸桿菌、鮑曼不動(dòng)桿菌和肺炎克雷伯菌中有產(chǎn)酶克隆株的流行。在巴西,腸桿菌科細(xì)菌中對(duì)碳青霉烯耐藥已成為主要問(wèn)題,特別是產(chǎn)KPC酶的耐藥株己在多個(gè)地區(qū)報(bào)道?！读~刀》報(bào)道的產(chǎn)NDM-1酶的超級(jí)細(xì)菌在大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中最多見,并且已傳播到印度以外

5、的國(guó)家。
　　雖然腸桿菌科細(xì)菌可通過(guò)產(chǎn)生金屬酶而對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥,但此類菌株的檢出率極少。自2001年報(bào)道第一株產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌以來(lái),有關(guān)碳青霉烯酶尤其是KPC酶的研究目前己成為國(guó)際關(guān)注焦點(diǎn),世界各地不斷出現(xiàn)此類菌株引起的醫(yī)院感染的報(bào)告,其檢出率亦呈快速上升的趨勢(shì)。2005年-2008年華山醫(yī)院臨床分離的肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南、美羅培南和厄他培南等抗菌藥的耐藥率均在2％以下,但2009年快速上升至13％左右;2010

6、年更是上升為26.3％。弗勞地檸檬酸桿菌2005年對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥率在1O％,2006年快速上升至45％左右,2007年-2009年維持在35％左右。進(jìn)一步的資料分析結(jié)果顯示,華山醫(yī)院臨床分離的對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥的腸桿菌科細(xì)菌中,大部分菌株集中于神經(jīng)外科病房和重癥ICU病房。由于KPC酶基因往往位于質(zhì)粒上,該質(zhì)粒同時(shí)亦可攜帶多種對(duì)其他抗菌藥耐藥的基因,因此產(chǎn)KPC酶的菌株往往具有高度的耐藥性和廣泛的播散性,臨床上對(duì)該類菌株引

7、起的感染治療是一個(gè)棘手的問(wèn)題。
　　基于此,本課題對(duì)2009年4月到2010年2月期間華山醫(yī)院臨床分離的82株對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥的腸桿菌科細(xì)菌(Carbapenem-Resislant Enterobacteriaceae,CRE)進(jìn)行了分子生物學(xué)及其臨床感染特征的研究,以明確本院CRE菌株的耐藥現(xiàn)狀、耐藥機(jī)制、傳播機(jī)制及其感染的危險(xiǎn)因素。為針對(duì)CRE感染的抗生素合理選用提供依據(jù),這對(duì)及時(shí)遏制CRE菌株引起的持續(xù)感染和暴發(fā)流行

8、,降低醫(yī)院感染的發(fā)生率和病死率有重要意義。本研究?jī)?nèi)容共包括以下四部分。
　　第一部分碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)及其同源性分析
　　為了解華山醫(yī)院腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥性,我們收集了2009年4月到2010年2月的1561株腸桿菌科細(xì)菌,采用紙片擴(kuò)散法對(duì)收集的菌株進(jìn)行耐藥譜的初步分析,并根據(jù)2010年更新版的CLSI(Clinical and Laboratory Standsrd Institute)

9、文件中各類抗生素對(duì)腸桿菌科細(xì)菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn),顯示1561株腸桿菌科細(xì)菌中肺炎克雷伯菌最常見,共檢出604株(38.7％),其中有113株CRE菌株;其次是大腸埃希菌,共檢出581株,其中有12株CRE菌株。在1561株腸桿菌科細(xì)菌中,奇異變形桿菌和陰溝腸桿菌各占5％左右,且18.1％的陰溝腸桿菌為CRE菌株;粘質(zhì)沙雷菌、斯氏普羅威登菌、摩根摩根菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、普通變形桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌和雷氏普羅威登菌的菌株比例在1-4％之間;其

10、余的菌株比例都在1％以下。細(xì)菌檢出以呼吸道和尿路為主要來(lái)源,各占46.4％(725/1561)和34.6％(540/1561)。男性患者有862位,女性患者有673位,另有26位信息缺失?；颊咧饕獮?0-80歲的中老年人,占59.4％(927/1561)。
　　按照2009年版CLSI文件標(biāo)準(zhǔn),除個(gè)別菌株保存不佳外,細(xì)菌經(jīng)分離純化培養(yǎng),最后共收集有82株CRE菌株作為本組受試菌株,包括68株肺炎克雷伯菌(Klebsiella pn

11、eumoniae、KPN)、3株大腸埃希菌(Escherichia coli、ECO)、3株陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae、ECL)、4株弗勞地檸檬酸桿菌(Citrobacter freundii、CFR)、1株產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes、EAE)、1株斯氏普羅威登菌(Providencia stuartii、PST)、1株丙二酸鹽檸檬酸桿菌(Citrobacter,malonate、

12、CML,)和1株產(chǎn)酸克雷伯菌(Klebsiella oxytoca、KOX)。采用瓊脂對(duì)倍稀釋法測(cè)定包括厄他培南、美羅培南和亞胺培南3種碳青霉烯類、頭孢菌素類、氟喹諾酮類和氨基糖苷類等16種抗生素對(duì)82株CRE菌株的 MIC,除了黏菌素和替加環(huán)素判斷標(biāo)準(zhǔn)按BSAC(Brifish Society for Antimicrobial Chemotherapy criteria,version9.1,March2010)外,其余MIC結(jié)果按

13、2010年更新版CLSI文件標(biāo)準(zhǔn)。以下研究的受試菌株均為82株CRE菌株。
　　藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,82株CRE菌株中68株耐碳青霉烯類抗生素的肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢他啶,頭孢噻肟,頭孢吡肟,氨曲南以及厄他培南的耐藥率為100％;對(duì)兩種酶抑制劑復(fù)方制劑(頭孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他巴唑坦)的耐藥率均為95％左右;對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率為90％左右:對(duì)阿米卡星和環(huán)丙沙星的耐藥率分別為85.3％和97.1％。68株耐碳青霉烯類抗生素

14、的肺炎克雷伯菌中有70％的菌株對(duì)磷霉素和多西環(huán)素敏感;對(duì)黏菌素、米諾環(huán)素和替加環(huán)素的耐藥率相對(duì)較低;分別為2.9％,7.4％和13.2％。14株其他CRE菌株對(duì)環(huán)丙沙星和厄他培南全耐藥;對(duì)兩種酶抑制劑復(fù)方制劑以及頭孢他啶、頭孢噻肟、氨曲南的耐藥率均為92.3％;84.6％的菌株對(duì)頭孢吡肟和阿米卡星耐藥;對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為76.9％和61.5％;近70％的菌株對(duì)磷霉素耐藥:近60％的菌株對(duì)多西環(huán)素耐藥;對(duì)黏菌素、米諾環(huán)素和

15、替加環(huán)素耐藥率分別為15.4％,38.5％和23.1％。16種抗生素中,黏菌素和替加環(huán)素對(duì)82株CRE菌株的抗菌活性比較高,以2μg/mL和4μg/mL的濃度可以抑制90％的細(xì)菌。82株CRE菌株對(duì)碳青霉烯類和頭孢菌素類抗生素表現(xiàn)出高度耐藥水平,如亞胺培南、美羅培南、厄他培南對(duì)82株CRE菌株的MIC50/MIC90的值分別是32/64μg/mL,64/128μg/mL和128/256μg/mL。對(duì)碳青霉烯類抗生素全耐藥的細(xì)菌有68株,

16、其中60株為肺炎克雷伯菌。頭孢菌素類抗生素對(duì)82株CRE菌株的MIC90值均≧256μg/mL。本組受試的82株CRE均為多重耐藥株,其中泛耐藥菌株有54株(65.9％,54/82)。
　　此外,對(duì)68株碳青霉烯類耐藥的肺炎克雷伯菌株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,碳青霉烯類抗生素聯(lián)合酶抑制劑克拉維酸或EDTA后,碳青霉烯類抗生素的抗菌活性幾乎沒(méi)有改變,但碳青霉烯類抗生素聯(lián)合3-氨基苯硼酸的抗菌活性有所提高,聯(lián)合3-氨基苯硼酸后的亞胺培南、美

17、羅培南、厄他培南對(duì)68株CRE肺炎克雷伯菌的MIC50/MIC90分別為1/1μg/mL,4/4μg/mL和8/8μg/mL,與單藥相比分別下降為單藥的1/32到1/64,特別是亞胺培南聯(lián)合3-氨基苯硼酸對(duì)細(xì)菌的作用特別強(qiáng)。碳青霉烯類抗生素聯(lián)合3-氨基苯硼酸后,對(duì)14株其他CRE菌株的抑菌作用也很明顯。碳青霉烯類抗生素聯(lián)合外排泵抑制劑MC207110對(duì)68株CRE肺炎克雷伯菌的體外抗菌活性無(wú)影響,而對(duì)14株其他CRE菌株的MIC50值顯

18、示有升高。
　　對(duì)68株碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌的:PFGE分型,采用Quantity One圖像分析軟件,可分為18個(gè)型別。3個(gè)主要型別分別是J型(14株,20.6％)、N型(12株,17.6％)和R型(12株,17.6％)。其余如Q型6株,I型5株,D型4株,G、H和P型各有2株,A、B、C、E、F、K、L、M和O型各一株。MLST分型顯示,優(yōu)勢(shì)的克隆株為ST-11型,有57株(83.8％),其他的有ST-350型2株,ST

19、-16,ST-22,ST-23,ST-27,ST-107,ST-148,ST-477,ST-494和ST-544型別各一株。PFGE的3種主要型別均屬于ST-11型。
　　本組資料提示:
　?、偬记嗝瓜╊惸退幹甏蠖酁榉耗退幹?65.9％,54/82)。
　?、陴ぞ睾吞婕迎h(huán)素具有體外抗CRE菌株的活性。
　?、厶记嗝瓜╊惵?lián)合3-氨基苯硼酸對(duì)CRE菌株具有良好的抗菌活性:碳青霉烯類抗生素和外排泵抑制劑MC20711

20、0的聯(lián)合,未見碳青霉烯類抗生素對(duì)碳青霉烯類耐藥株的MICs降低。
　　④本組受試細(xì)菌存在3個(gè)主要克隆流行株,即J型(14株,20.6％)、N型(12株,17.6％)和R型(12株,17.6％)。ST-11為主要優(yōu)勢(shì)型別占83.8％(57/68)。PFGE分型中的主要型別J、N和R型都屬于ST-11。
　　第二部分CRE菌株中碳青霉烯酶及β-內(nèi)酰胺酶基因型的分析
　　本研究采用改良Hodge試驗(yàn)(MHT)和3-氨基苯硼酸

21、檢測(cè)法進(jìn)行碳青霉烯酶表型的檢測(cè)。MHT對(duì)82株CRE的碳青霉烯酶的檢出菌株數(shù)為67株。以PCR方法為金標(biāo)準(zhǔn),改良Hodge試驗(yàn)對(duì)82株CRE的碳青霉烯酶的檢出敏感性和特異性分別是89.9％(62/69)和61.5％(8/13)。假陽(yáng)性率和假陰性率分別為7.2％(5/69)和53.8％(7/13)。3-氨基苯硼酸抑制實(shí)驗(yàn)檢測(cè)82株CRE中產(chǎn)碳青霉烯酶的菌株有70株,與PCR方法相比較,其靈敏度和特異性分別為92.7％(64/69)和53.

22、8％(7/13);假陽(yáng)性率和假陰性率分別為8.8％(6/69)和38.5％(5/13)。改良Hodge試驗(yàn)以及3-氨基苯硼酸2種方法對(duì)CRE腸桿菌科細(xì)菌中產(chǎn)碳青霉烯酶的檢出率分別與PCR方法相比較,并作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,顯示差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。EDTA協(xié)同碳青霉烯類抗生素檢測(cè)金屬酶結(jié)果顯示82株CRE菌株中未檢測(cè)到細(xì)菌產(chǎn)金屬酶。
　　目前,檢測(cè)KPC型碳青霉烯酶等耐藥基因的金標(biāo)準(zhǔn)仍是通過(guò)PCR擴(kuò)增編碼KPC酶的耐藥基因并配

23、合DNA測(cè)序分析,以明確KPC酶的型別。我們采用PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)82株CRE菌株中的碳青霉烯酶基因進(jìn)行擴(kuò)增,并作DNA測(cè)序,結(jié)果顯示,在肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、弗勞地檸檬酸桿菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌菌種中都檢出到產(chǎn)KPC酶的菌株。84.1％(69/82)的CRE菌株產(chǎn)生KPC型碳青霉烯酶酶,2株同時(shí)產(chǎn)OXA-69like型碳青霉烯酶。未檢測(cè)到產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶的菌株。
　　此外,采用PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)82株CRE菌

24、中包括ESBLs和質(zhì)粒AmpC酶基因在內(nèi)的β-內(nèi)酰胺酶基因進(jìn)行擴(kuò)增和作DNA測(cè)序分析,結(jié)果顯示編碼ESBLs酶的基因在CRE細(xì)菌中普遍存在。其中產(chǎn)CTX-M型ESBLs酶的菌株有74株(90.2％):SHV-12型ESBLs酶有33株(40.2％),1株產(chǎn)SHV-31型ESBL。6株CRE細(xì)菌產(chǎn)質(zhì)粒介導(dǎo)的AmpC酶,占7.3％(6/82),均為DHA-1型酶基因。產(chǎn)OXA-1、OXA-2和OXA-10等超廣譜酶的細(xì)菌各檢出1株:產(chǎn)TEM

25、-1廣譜酶的細(xì)菌占35.4％(29/82)。上述69株產(chǎn)KPC酶的CRE菌株中,僅1株細(xì)菌為單產(chǎn)KPC酶,其余67株合并產(chǎn)。ESBL,酶,另有1株合并產(chǎn)AmpC型酶。
　　為了解臨床分離的CRE細(xì)菌中編碼的KPC酶基因是否可在不同種屬的細(xì)菌間進(jìn)行傳播,我們對(duì)4株同時(shí)產(chǎn)KPC-2酶和CTX-M型ESBL或DHA-1酶的CRE菌株(弗勞地檸檬酸桿菌和肺炎克雷伯菌各2株)進(jìn)行了接合轉(zhuǎn)移試驗(yàn)。受體菌為大腸埃希菌J53(對(duì)疊氮鈉耐藥)和EC

26、600(對(duì)利福平耐藥)。結(jié)果顯示,2株弗勞地檸檬酸桿菌分別將耐藥質(zhì)粒轉(zhuǎn)移接合到了受體菌大腸埃希菌J53和EC600。KPC酶基因的PCR擴(kuò)增和耐藥表型測(cè)定轉(zhuǎn)移接合子均和供體細(xì)菌一致。抽提供體菌CRE-3180和相應(yīng)的大腸埃希菌J53的接合子中的質(zhì)粒,對(duì)其進(jìn)行了地高辛標(biāo)記的檢測(cè)KPC基因的southern雜交試驗(yàn),結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)移到接合子中的質(zhì)粒攜帶KPC基因,質(zhì)粒大小為23kb左右。而以EC600為受體菌的3株接合子中均檢測(cè)到3條質(zhì)粒,經(jīng)

27、過(guò)southern雜交試驗(yàn)證實(shí),3條質(zhì)粒均帶有KPC基因。質(zhì)粒大小不等,除一條為23kb左右外,其余兩條在23kb以上。
　　本研究采用PCR方法對(duì)I、II、Ⅲ類整合子在CRE菌中的分布及其攜帶的耐藥基因盒進(jìn)行了分析,結(jié)果顯示68株CRE肺炎克雷伯菌株中I類整合子和Ⅱ類整合子的檢出率分別為55.9％(38/68)和4.4％(3/68)。其余14株CRE菌株的I類整合子和Ⅱ類整合子的檢出率分別為78.5％(11/14)和7.1％(1

28、/14)。未見Ⅲ類整合子檢出。I類整合子陽(yáng)性的細(xì)菌中有91.8％(45/49)的菌株為產(chǎn)KPC酶株且同時(shí)合并產(chǎn)ESBl內(nèi)酰胺酶,其中肺炎克雷伯菌占了73.4％(36/49)。Ⅱ類整合子陽(yáng)性的細(xì)菌中產(chǎn)KPC酶的菌株有3株,且均為肺炎克雷伯菌。同時(shí)兼有兩類整合子檢出的細(xì)菌有2株,均為產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌。PCR擴(kuò)增整合子可變區(qū)的序列,可以得到3種大小不同的片段,分別約為250bp,750bp和1000bp?？勺儏^(qū)序列用HinfⅠ酶切后得

29、到3組不同的片段。對(duì)PCR陽(yáng)性結(jié)果的可變區(qū)序列進(jìn)行測(cè)序,除了編碼氨基糖苷類鈍化酶基因aac(3)-I外,未發(fā)現(xiàn)其他耐藥基因盒。
　　本組資料結(jié)果提示:
　　①KPC-2型碳青霉烯酶是腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類耐藥的主要機(jī)制之一。
　?、贙PC-2基因可由質(zhì)粒攜帶,并可在不同的細(xì)菌種屬間進(jìn)行轉(zhuǎn)移播散。
　?、跧類整合子在本試驗(yàn)菌株中檢出率高(59.7％,49/82)。
　?、芨牧糎odge試驗(yàn)和3-氨基苯硼酸抑

30、制試驗(yàn)檢測(cè)腸桿菌科細(xì)菌中碳青霉烯酶的靈敏度高;與PCR方法比較,上述兩種方法對(duì)CRE腸桿菌科細(xì)菌中碳青霉烯酶的檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　第三部分碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌的外膜孔蛋白分析
　　采用外膜孔蛋白SDS-PAGE電泳對(duì)82株CRE菌株的外膜孔蛋白進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,22株CRE菌株存在OmpK35或其同源膜孔蛋白(如OmPC)的下調(diào),其中17株為肺炎克雷伯菌;有22株存在OmpK35或其同源膜孔蛋白的缺失,其中

31、15株為肺炎克雷伯菌;OmpK35或其同源膜孔蛋白正常的為38株CRE,其中36株為肺炎克雷伯菌。10株CRE菌株存在OmpK36或其同源膜孔蛋白(如OmpF)的下調(diào),其中5株為肺炎克雷伯菌;有57株存在OmpK36或其同源膜孔蛋白的缺失,其中48株為肺炎克雷伯菌;OmpK36或其同源膜孔蛋白正常的為15株CRE,全部為肺炎克雷伯菌。同時(shí)有OmpK35和OmpK36或其同源膜孔蛋白缺失的有12株,其中9株為肺炎克雷伯菌。65.8％(54

32、/82)的肺炎克雷伯菌株缺失OmpK35和OmpK36中的1條或者兩條都缺失,兩種膜孔蛋白表達(dá)都正常的有12株,全部為肺炎克雷伯菌。從膜孔蛋白角度看,OmpK36蛋白缺失的菌株占多數(shù),肺炎克雷伯菌中有48株,14株其他CRE菌株中有9株。
　　本組試驗(yàn)顯示細(xì)菌膜孔蛋白的缺失或下調(diào)表達(dá)也是腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類產(chǎn)生耐藥的機(jī)制之一。
　　第四部分產(chǎn)KPC酶的CRE菌株感染患者的臨床感染特征及危險(xiǎn)因素
　　為了解CRE菌株

33、感染或定植患者的臨床感染特征及感染的危險(xiǎn)因素,我們對(duì)本研究中68份保存完整的病史資料進(jìn)行了回顧性的調(diào)查分析,同時(shí)以同期85份臨床分離的對(duì)碳青霉烯類抗生素敏感的菌株(CSE)檢出患者的病史資料作為對(duì)照,剔除或者不剔除定植菌株的患者資料,分析CRE和CSE菌株感染患者的臨床特征,然后剔除其他菌株,分析產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌感染患者(非產(chǎn)KPC酶組分為兩種情況:CRE組非產(chǎn)KPC酶+CSE非產(chǎn)KPC酶株感染的患者、CSE非產(chǎn)KPC酶株感染的

34、患者)的潛在危險(xiǎn)因素。結(jié)果顯示,CRE菌株感染患者的總住院天數(shù)平均值為49.55±36.91天,有56(96.6％)位患者為院內(nèi)感染,2(3.4％)位患者為院外感染。住院期間有一次或以上手術(shù)者占37.9％(22/58)。有63.8％(37/58)的患者住院期間更換床位一次或以上,15.5％(9/58)的患者住院期間更換床位三次及以上。除2位患者沒(méi)有創(chuàng)傷性操作外,其余都有過(guò)創(chuàng)傷性的操作如氣管切開、深淺靜脈穿刺、腰穿和/或引流等。分別有94

35、.8％(55/58)、53.4％(31/58)的患者使用過(guò)導(dǎo)尿管和接受機(jī)械通氣:住院期間,抗菌藥物的使用情況如下:使用碳青霉烯類、喹諾酮類、氨基糖苷類、頭孢菌素類和其他類別抗生素(如四環(huán)素類、抗結(jié)核藥物、惡唑烷酮類、磷霉素類、抗真菌類和萬(wàn)古霉素類等)的患者數(shù)分別占70.7％(41/58)、35.3％(24/58)、39.7％(23/58)、43.1％(25/58)和75.9％(44/58)。58位患者用于治療疾病的總費(fèi)用平均值為4.08

36、x10(6)±1.74×10(5)元。除6位患者死亡,4位患者未愈之外,其余都有好轉(zhuǎn)或治愈。單因素分析CRE菌株感染患者的臨床特征,提示醫(yī)院感染、碳青霉烯類應(yīng)用、侵襲性操作、手術(shù)、床位更換、氨基糖苷類應(yīng)用、基礎(chǔ)疾病、神經(jīng)外科和.ICU病房的差異是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的。多因素分析醫(yī)院感染是CRE菌株感染患者的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　單因素分析產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌感染的危險(xiǎn)因素包括醫(yī)院感染、碳青霉烯類應(yīng)用、侵襲性操作、神經(jīng)外科和ICU病房。多

37、因素分析顯示,其中醫(yī)院感染、神經(jīng)外科和ICU病房是產(chǎn):KPC酶肺炎克雷伯菌感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　本組資料提示:
　?、偬记嗝瓜╊惡皖^孢菌素類抗生素在臨床感染治療中使用頻繁;
　?、卺t(yī)院感染是ERE菌株感染患者的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。醫(yī)院感染、神經(jīng)外科和ICU病房是產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素;
　?、叟R床應(yīng)加強(qiáng)CRE菌株的監(jiān)測(cè)并采取行之有效的醫(yī)院感染控制措施限制CRE菌株的進(jìn)一步播散,例如對(duì)檢出CRE菌株