碳青霉烯類(lèi)耐藥腸桿菌科細(xì)菌耐藥機(jī)制及危險(xiǎn)因素分析.pdf

1、目的：本研究主要分析碳青霉烯類(lèi)耐藥腸桿菌科細(xì)菌（CRE菌株）耐藥的分子機(jī)制及相關(guān)危險(xiǎn)因素。
　　方法：收集福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院2011年8月至2012年8月臨床分離非重復(fù)CRE菌株，檢測(cè)其厄他培南（ETP）、亞胺培南（IPM）及美羅培南（MEM）的最低抑菌濃度（MIC）篩查菌株；采用改良Hodge試驗(yàn)及組合紙片法進(jìn)行碳青霉烯酶表型鑒定、瓊脂稀釋法測(cè)其藥敏；聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs）、碳青霉烯酶和

2、頭孢菌素酶（AmpC）耐藥基因；采用腸桿菌基因間保守重復(fù)序列-聚合酶鏈反應(yīng)（ERIC-PCR）對(duì)菌株進(jìn)行同源性分析；對(duì)檢出碳青霉烯類(lèi)基因的CRE菌株進(jìn)行接合實(shí)驗(yàn)了解其傳遞性；最后通過(guò)調(diào)查感染CRE菌株患者的臨床病例資料以了解其感染的相關(guān)危險(xiǎn)因素。
　　結(jié)果：共篩查出109株CRE菌株，其中肺炎克雷伯菌41株，陰溝腸桿菌29株，大腸埃希菌21株，摩根摩根菌5株，產(chǎn)酸克雷伯菌5株，奇異變形桿菌3株，普通變形桿菌2株，黏質(zhì)沙雷菌2株，產(chǎn)

3、氣腸桿菌1株；改良Hodge試驗(yàn)檢出70例產(chǎn)碳青霉烯酶；組合紙片法檢出單產(chǎn)金屬酶34株，單產(chǎn)KPC酶11株，1株同時(shí)產(chǎn)金屬酶和KPC酶。41株肺炎克雷伯菌、29株陰溝腸桿菌和21株大腸埃希菌對(duì)厄他培南/亞胺培南耐藥率分別為97.6％/73.2%、75.9%/62.1%、76.2%/57.1%，對(duì)頭孢西丁耐藥率為100%，對(duì)頭孢菌素及氨曲南的耐藥率高達(dá)90%左右。其他18株CRE菌株對(duì)亞胺培南耐藥率高達(dá)94.4%，而對(duì)美羅培南全部敏感。依

4、據(jù)ERIC-PCR分型結(jié)果41株肺炎克雷伯菌可分為33個(gè)不同型別；29株陰溝腸桿菌可分為23個(gè)不同型別；21株大腸埃希菌可分為13個(gè)不同型別。接合實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：54株檢測(cè)出碳青霉烯酶基因的CRE菌株有33株接合成功。耐藥基因經(jīng)擴(kuò)增及測(cè)序檢出產(chǎn)碳青霉烯酶基因共54株，其中單產(chǎn)IMP型酶基因有40株（40.37%,44/109），分別為IMP-4型酶基因26株，IMP-8型酶基因14株。有1株細(xì)菌同時(shí)攜帶IMP-4和NDM-1基因。有2株CRE

5、菌株同時(shí)產(chǎn)IMP-8和KPC-2。單產(chǎn)NDM-1型酶基因檢出4株（4.58%,5/109）。單產(chǎn)KPC型酶基因有7株（6.42%,7/109），均為KPC-2。TEM型檢出66株，均為T(mén)EM-1型；SHV型48株陽(yáng)性，其中20株SHV-12，14株SHV-11，7株SHV-26，2株SHV-28，2株SHV-31，1株SHV-1，1株SHV-2和1株SHV-33；CTX-M-9組24株陽(yáng)性，其中17株CTX-M-14，7株CTX-M-6

6、5。CTX-M-1組17株陽(yáng)性，其中7株CTX-M-115，5株CTX-M-79，3株CTX-M-3，2株CTX-M-22；10株CRE細(xì)菌產(chǎn)AmpC酶，其中單產(chǎn)CIT型酶基因7株，單產(chǎn)MOX型酶基因2株，1株同時(shí)含EBC和CIT型酶基因。69.15%（65/94）的患者住院期間更換床位一次或以上，并且28.72%（27/94）患者更換床位三次及以上；96.81%（91/94）有過(guò)創(chuàng)傷性的操作；56.38%（53/94）患者同時(shí)合并感染

7、多種耐藥菌株。使用碳青霉烯類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)、內(nèi)酰胺類(lèi)和其他類(lèi)別抗生素（如四環(huán)素類(lèi)、惡唑烷酮類(lèi)、磷霉素類(lèi)、抗真菌類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、磺胺類(lèi)和萬(wàn)古霉素類(lèi)等）的患者數(shù)分別占47.87%（45/94）、44.68%（42/94）、24.47%（23/94）、55.32%（52/94）、57.45%（54/94）、42.55%（40/94）。
　　結(jié)論：分離自福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院的CRE菌株主要以肺炎克雷伯菌為主，其耐藥機(jī)