VEGF-C-VEGFR-3及D2-40在喉鱗狀細胞癌中的表達和意義.pdf

1、目的:喉癌是耳鼻喉-頭頸外科最常見的惡性腫瘤之一。目前喉癌的治療仍是以外科手術(shù)為主,輔以放、化療及生物治療。盡管手術(shù)方式不斷改進,綜合治療手段不斷完善,但喉癌的5年生存率仍無顯著提高,局部復發(fā)及淋巴道轉(zhuǎn)移為治療失敗的主要原因。因此,了解淋巴轉(zhuǎn)移的機制對于喉癌的診斷、治療具有重要的臨床意義。
　　 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是一類與肝素結(jié)合的生長因子,VEGF-C是VEGF的一種新同源物,是目前己知的最為重要的淋巴管生成誘導因子

2、,可以選擇性地促進淋巴管增生和擴張,增強淋巴管通透性,促進腫瘤周圍相關(guān)淋巴管的生長,有利于腫瘤細胞經(jīng)淋巴管轉(zhuǎn)移播散。VEGFR-3屬于受體酪氨酸蛋白激酶家族,為淋巴內(nèi)皮細胞上第一個被克隆的分子標志物,是VEGF的特異性受體,VEGF-C通過多種病理和生理途徑與其受體VEGFR-2和VEGFR-3反應,刺激血管和淋巴管增生。D2-40是一種新近發(fā)現(xiàn)的特異性抗M2A抗原的單克隆抗體,被認為是目前最特異性的新生淋巴管內(nèi)皮細胞標記物。本實驗通過

3、觀察三種蛋白在喉癌中的表達,為了解喉癌淋巴道轉(zhuǎn)移機制及判斷預后提供新的思路。
　　 方法:材料收集自2008年1月至2009年12月于河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科住院行手術(shù)治療的喉癌患者。其中喉癌組織40例、相應癌旁組織40例(距腫瘤切緣至少0.5cm),并取19例同期行手術(shù)治療的非喉部疾病的正常喉粘膜組織做為對照。應用免疫組織化學及流式細胞術(shù)方法檢測VEGF-C、VEGFR-3和D2-40在喉癌組織、癌旁組織及正常喉

4、粘膜組織中的表達。運用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。以P≤05為差異在統(tǒng)計學上有顯著性意義,P≤0.01為差異在統(tǒng)計學上有非常顯著性意義。
　　 結(jié)果:
　　 1 VEGF-C的表達
　　 1.1免疫組化法:VEGF-C在喉癌、癌旁及正常喉粘膜中均有表達,其表達強度呈下降趨勢,三組相比有非常顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組VEGF的表達高于癌旁組與正常組(P＜0.01,P＜0.01),而正常組與癌

5、旁組相比無顯著性差異(P＞0.05)。VEGF-C的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)、臨床分型(P＜0.01)有關(guān),與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 1.2流式細胞術(shù):VEGF-C在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中的均有表達(FI值分別為:1.4522±0.1884,1.0816±0.0853,0.9971±0.0088),三組相比有非常顯著性差異(P＜0.01)。喉癌

6、組織中VEGF-C的表達量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,VEGF-C的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)及臨床分型(P＜0.01)有關(guān),與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 2 VEGFR-3的表達
　　 2.1免疫組化法:VEGFR-3在喉癌、癌旁及正常喉粘膜

7、中均有表達,其表達強度呈下降趨勢,三組相比有非常顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組VEGFR-3的表達高于癌旁組與正常組(P＜0.01,P＜0.01),而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P＞0.05)。VEGFR-3的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)及臨床分型(P＜0.01)有關(guān),與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 2.2流式細胞術(shù):VEGFR-3在喉癌組織、癌旁組織及

8、正常粘膜中均有表達(FI值分別為1.4974±0.1884,1.1116±0.1385,1.00311±0.0570),三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中VEGFR-3的表達量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,VEGFR-3的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.05)及臨床分型(P＜0.01)有關(guān),與病理分

9、級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 3 D2-40的表達
　　 3.1免疫組化法:D2-40在喉癌組織、癌旁組織和正常粘膜組織中均有表達,其表達強度呈下降趨勢,三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組高于癌旁組與正常組(P＜0.01,P＜0.01),而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P＞0.05)。D2-40與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.05)和臨床分型(P＜0.05)有關(guān)

10、,與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 3.2流式細胞術(shù):D2-40在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中均有表達(FI值分別為2.1155±0.2585,1.2049±0.1618,1.0018±0.0168),三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中D2-40的表達量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉

11、癌組織中,D2-40的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)及臨床分型(P＜0.01)有關(guān)。與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 4喉癌組織中VEGF-C、VEGFR-3蛋白與D2-40蛋白的表達有多元線性回歸關(guān)系,且均為正相關(guān),D2-40蛋白表達隨著VEGF-C和VEGFR-3蛋白增大而增大,多元線性回歸方程為YD=0.753Xc+0.466XR-0.430(F=9.973,

12、P=0.001)。
　　 結(jié)論:
　　 1 VEGF-C、VEGFR-3及D2-40蛋白在喉鱗狀細胞癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中均有表達。
　　 2 VEGF-C、VEGFR-3及D2-40蛋白在喉癌組織中的定量及定性表達均明顯高于癌旁組織及正常喉粘膜組織,可能與喉癌的發(fā)展有關(guān)。
　　 3 VEGF-C、VEGFR-3及D2-40蛋白在喉癌組織中的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、臨床分型有相關(guān)性;與病理