化肝通絡(luò)方對(duì)原發(fā)性膽汁性肝硬化治療作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:建立膽汁淤積性肝硬化大鼠模型，測(cè)定大鼠的血清肝功能指標(biāo)、血清α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體（TIMP-1）、細(xì)胞間粘附分子(ICAM-1)的表達(dá)，檢測(cè)肝臟組織中NFκB、TGF-β1、Smad3、Smad7的表達(dá)，評(píng)價(jià)化肝通絡(luò)方的療效并探討其作用機(jī)制。
　　方法:72只SD雄性大鼠，利用結(jié)扎大鼠膽總管制造大鼠膽汁淤積肝硬化模型，隨機(jī)分為6組，模型組，化肝通絡(luò)方低劑量組、化肝通絡(luò)方中劑量組、化

2、肝通絡(luò)方高劑量組、熊去氧膽酸(Ursodeoxycholic Acid UDCA)組、假手術(shù)組，于造后第5周開始給藥，化肝通絡(luò)方低、中、高劑量組分別給予小、中、大(1.09g/kg/d、2.18g/kg/d、4.36g/kg/d)劑量中藥湯劑灌胃; UDCA組給予58.3mg/kg/d混濁液灌胃;假手術(shù)組與模型組同時(shí)給予同體積蒸餾水灌胃，每日1次，連續(xù)4周。末次給藥后24h，取血，處死大鼠，(1)取血清測(cè)谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶

3、(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)等肝功能指標(biāo);(2)取部分肝臟行HE染色觀察肝臟病理形態(tài)變化;(3)大鼠血清酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)測(cè)定血清α-SMA、TIMP-1、ICAM-1(4)大鼠部分肝組織Real-time PCR(RT-PCR)測(cè)定NFκB、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factor TGF-β1)、TIMP-1、ICAM

4、-1的表達(dá);(5)肝組織免疫組化測(cè)TGF-β1、Smad3、Smad7;
　　結(jié)果:(1)模型組與假手術(shù)組相比，模型組大鼠血清TBil、DBil、ALT、AST等肝功能指標(biāo)明顯升高，并且血清中α-SMA、TIMP-1、ICAM-1高表達(dá)（P＜0.01或P＜0.05），模型組大鼠肝臟出現(xiàn)炎性細(xì)胞活動(dòng)及纖維組織增生等病理改變;(2)化肝通絡(luò)方各組及UDCA組與模型組比較，血清肝功能指標(biāo)ALT、AST、TBil、DBil明顯降低、各項(xiàng)肝

5、纖維化化指標(biāo)α-SMA、TIMP-1、ICAM-1均有明顯下降（P＜0.01或P＜0.05），同時(shí)化肝通絡(luò)方能夠降低模型大鼠肝組織中TGF-β1、Smad3蛋白的表達(dá)，并能夠升高Smad7的表達(dá)(P＜0.05);(3)化肝通絡(luò)方各組與UDCA組比較，化肝通絡(luò)方高劑量組血清指標(biāo)(P＞0.05)無顯著差異，中低劑量組(P＜0.05)，存在顯著差異。
　　結(jié)論:(1)化肝通絡(luò)方對(duì)于膽汁淤積性肝硬化動(dòng)物模型具有明顯改善肝功能和緩解肝硬化的