血清BDNF水平及BDNF單核苷酸多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)性研究.pdf

1、糖尿病是一組以血糖持續(xù)增高為特征性表現(xiàn)的代謝紊亂綜合征,其病理生理基礎(chǔ)是胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能紊亂,它是具有明顯的遺傳基礎(chǔ)的多基因復(fù)雜性疾病。據(jù)統(tǒng)計(jì),目前世界上糖尿病患病人數(shù)已高達(dá)2億5千萬人,每年新發(fā)病6百萬,其中90％以上是2型糖尿病。
　　 越來越多的研究表明:2型糖尿病和認(rèn)知功能損傷有關(guān)。2型糖尿病患者癡呆的風(fēng)險(xiǎn)比正常人增加兩倍,它不僅是血管性癡呆的危險(xiǎn)因子,同時(shí)也是阿茲海默病的危險(xiǎn)因子。盡管高血糖、血管病變、低血糖

2、、胰島素抵抗可能在2型糖尿病的認(rèn)知損傷過程中發(fā)揮一定的作用,但是具體的神經(jīng)病理生理機(jī)制和遺傳關(guān)聯(lián)仍不清楚。
　　 腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(NTs)家族的重要一員,廣泛分布在中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng),尤其在海馬和大腦皮層含量最高。研究表明BDNF可以影響神經(jīng)元細(xì)胞的分化、突觸連接和修復(fù)過程,此外,BDNF還可以調(diào)節(jié)活動(dòng)依賴性突觸可塑性,增強(qiáng)海馬區(qū)的

3、長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)效應(yīng)(LTP),因而與學(xué)習(xí)、記憶等認(rèn)知過程密切相關(guān)。在諸如水迷宮、被動(dòng)回避等認(rèn)知功能測(cè)試中都顯示BDNF抑制可以導(dǎo)致LTP減少,記憶功能受損。
　　 除了BDNF對(duì)學(xué)習(xí)和記憶的影響,大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)BDNF還可以參與血糖和能量代謝調(diào)節(jié),具有明顯的降血糖效應(yīng)。例如,近來研究發(fā)現(xiàn)外源性給予BDNF可以改善糖尿病小鼠的血糖和脂質(zhì)代謝,抑制能量消耗。BDNF缺乏的轉(zhuǎn)基因小鼠出現(xiàn)高血糖,過高的血糖又可以抑制BDNF的分泌。臨床研

4、究則表明:2型糖尿病患者存在循環(huán)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子水平降低,這種降低和胰島素抵抗呈負(fù)相關(guān)。在以認(rèn)知功能損傷為特征的阿茲海默病患者中,也發(fā)現(xiàn)其血清BDNF下降。這提示BNDF可能不僅參與了2型糖尿病并發(fā)的認(rèn)知障礙的發(fā)病過程,而且也可能參與了2型糖尿病的發(fā)病過程。
　　 本研究擬從BDNF基因多態(tài)性分析和血清BDNF水平變化的角度初步探討B(tài)DNF與2型糖尿病認(rèn)知功能障礙的關(guān)系,此外,BDNF基因多態(tài)性和2型糖尿病的關(guān)系、BDNF基因

5、多態(tài)性與長(zhǎng)期氯氮平治療的精神分裂癥患者并發(fā)2型糖尿病的關(guān)系也將被討論。
　　 第一部分2型糖尿病認(rèn)知功能與血清腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子水平的相關(guān)性研究
　　 目的:研究2型糖尿病認(rèn)知功能變化和血清腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)水平的關(guān)系。
　　 方法:2型糖尿病組144例,正常對(duì)照120例,調(diào)查所有受試的人口學(xué)資料和臨床資料,并進(jìn)行重復(fù)性成套神經(jīng)心理狀態(tài)測(cè)驗(yàn)(RBANS)測(cè)試認(rèn)知功能,酶聯(lián)免疫分析法(enzyme li

6、nked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)血清腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子水平。
　　 小結(jié):2型糖尿病存在認(rèn)知功能損傷,這種認(rèn)知損傷尤其是注意和延時(shí)記憶功能下降和血清BDNF水平降低有關(guān)。
　　 第二部分腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子基因多態(tài)性和2型糖尿病認(rèn)知障礙的關(guān)聯(lián)性研究
　　 目的:探討腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子基因多態(tài)性和2型糖尿病認(rèn)知障礙的關(guān)聯(lián)性。
　　 方法:所有受試均為來自河北醫(yī)科大學(xué)唐山工人醫(yī)

7、院內(nèi)分泌科門診及住院的漢族2型糖尿病患者,根據(jù)RBANS評(píng)分,分為2型糖尿病認(rèn)知障礙組93例,2型糖尿病無認(rèn)知障礙組192例。
　　 在征得研究對(duì)象知情同意的情況下,對(duì)其采取外周靜脈血,提取基因組DNA,利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng).限制性內(nèi)切酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技術(shù),檢測(cè)BDNF基因的rs

8、6265、rs12273539、rs10835210和rs2030324四個(gè)SNPs的基因型。V應(yīng)用擬合優(yōu)度X2檢驗(yàn),計(jì)算每個(gè)SNP位點(diǎn)的基因型頻數(shù)分布是否符合Hardy-Weinberg平衡;應(yīng)用SPSS15.0軟件進(jìn)行資料的描述,應(yīng)用在線多功能遺傳學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件SHEsis進(jìn)行各個(gè)SNP和單倍體與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)性分析;UNPHASED3.1軟件進(jìn)行數(shù)量性狀分析。
　　 小結(jié):BDNF基因是T2DM-CI的易感基因或與T2DM-

9、CI的易感基因緊密連鎖,BDNF基因與T2DM-CI的關(guān)聯(lián)存在性別差異。
　　 第三部分腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子單核苷酸多態(tài)性與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)研究
　　 目的:探討腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子基因多態(tài)性和2型糖尿病的關(guān)聯(lián)性。
　　 方法:共入組411例2型糖尿病患者和375例無血緣關(guān)系、且年齡、性別匹配的健康對(duì)照者,受試者都是唐山漢族居民,常規(guī)測(cè)量身高、體重、腰圍、臀圍以及血糖、血脂等糖尿病相關(guān)指標(biāo)。ELISA法檢測(cè)糖尿病患者

10、的血清胰島素水平,并計(jì)算體重指數(shù)、腰臀比、胰島素抵抗指數(shù)和胰島β細(xì)胞功能指數(shù)。
　　 在征得研究對(duì)象知情同意的情況下,對(duì)其采取外周靜脈血,提取基因組DNA,采用PCR-RFLP技術(shù),檢測(cè)BDNF基因rs6265、rs12273539、rS10835210和rs2030324四個(gè)SNPs的基因型。
　　 應(yīng)用擬合優(yōu)度X2檢驗(yàn),計(jì)算每個(gè)SNP位點(diǎn)的基因型頻數(shù)分布是否符合Hardy-Weinberg平衡;應(yīng)用SPSS15.0軟

11、件進(jìn)行資料描述,應(yīng)用在線多功能遺傳學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件SHEsis進(jìn)行各個(gè)SNP和單倍體與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)性分析;UNPHASED3.1軟件進(jìn)行數(shù)量性狀分析。
　　 小結(jié):
　　 (1)BDNF rs6265(G/A)基因型與2型糖尿病的發(fā)病相關(guān)聯(lián)。
　　 (2)BDNF rs6265(G)-rs12273539(T)、rs6265(A)-rs2030324(T)、r86265(G)-rs12273539(T)-rs203

12、0324(C)、rs6265(G)-rs10835210(C)-rs12273539(T)-rs2030324(C)單倍型與T2DM發(fā)病相關(guān),rs6265(A)-rs10835210(C)與男性T2DM發(fā)病相關(guān),rs6265(G)-rs12273539(T)-rs2030324(C)與女性T2DM發(fā)病相關(guān)。
　　 (3)數(shù)量性狀分析提示:rs6265和rs10835210與HOMA-IR和血清HDL-C水平的變化相關(guān)聯(lián)。

13、　　 (4)BDNF基因可能是中國(guó)漢族人群2型糖尿病的易感基因,BDNF基因多態(tài)性與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)可能是通過影響胰島素抵抗發(fā)揮作用的。
　　 第四部分長(zhǎng)期氯氮平治療的精神分裂癥患者并發(fā)糖尿病的危險(xiǎn)因素分析及其與BDNF val66met單核苷酸多態(tài)性的關(guān)系
　　 目的:研究中國(guó)漢族長(zhǎng)期氯氮平治療的精神分裂癥患者糖尿病的患病率、相關(guān)危險(xiǎn)因素及其與BDNFval66met單核苷酸多態(tài)性的關(guān)系。
　　 方法:本研究

14、為橫斷面調(diào)查研究,206名符合DSM-IV精神分裂癥診斷標(biāo)準(zhǔn)的中國(guó)漢族患者入組。所有患者病程超過5年,持續(xù)服用氯氮平時(shí)間超過12個(gè)月。糖尿病診斷采用1999年WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)。BDNF val66met基因分型使用PCR-RFLP方法。
　　 小結(jié):長(zhǎng)期服用氯氮平的精神分裂癥人群糖尿病患病率明顯升高,相關(guān)危險(xiǎn)因素包括糖尿病家族史、年齡增加、體重增加和女性性別。BDNFval66met基因多態(tài)性可能與長(zhǎng)期服用氯氮平的精神分裂癥人群糖