靶向c-mvc基因小RNA干擾對(duì)膽囊癌細(xì)胞侵襲運(yùn)動(dòng)的影響.pdf

1、目的:通過(guò)觀察c-myc對(duì)膽囊癌細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和侵襲能力的影響,以論證c-myc在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用,為膽囊癌侵襲和轉(zhuǎn)移干預(yù)提供分子靶點(diǎn)。
　　 方法:采用實(shí)時(shí)定量PCR和westernblot檢測(cè)親代和高轉(zhuǎn)移膽囊癌細(xì)胞系中c-myc基因表達(dá),設(shè)計(jì)靶向c-myc的小RNA[smallinterferenceRNA,siRNA]轉(zhuǎn)染高轉(zhuǎn)移的膽囊癌細(xì)胞,通過(guò)體外侵襲實(shí)驗(yàn)研究c-mycsiRNA對(duì)膽囊癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。此

2、外,通過(guò)westernblot方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染c-mycsiRNA后c-myc下游部分信號(hào)通路的變化,進(jìn)一步研究c-mycsiRNA抑制膽囊癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的機(jī)制。
　　 結(jié)果:通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),c-myc的RNA水平在GBC-SD/M3細(xì)胞中是其在GBC-SD細(xì)胞中的2.18倍(p=0.0019);在蛋白水平上,c-myc在GBC-SD/M3中的表達(dá)也高于其在GBC-SD中的表達(dá)。靶向c-myc的siRNA轉(zhuǎn)染GBC-SD/M

3、3細(xì)胞后,與對(duì)照相比,c=mycsiRNA能夠有效地抑制c-myc蛋白在GBC-SD/M3細(xì)胞中的表達(dá)。與對(duì)照相比,c-mycsiRNA可以有效的抑制GBC-SD/M3細(xì)胞的遷移(p=0.0168)。對(duì)GBC-SD/M3細(xì)胞的侵襲能力檢測(cè)后發(fā)現(xiàn),c-mycsiRNA同樣也能夠有效的抑制GBC-SD/M3細(xì)胞的侵襲(p=0.0005)。進(jìn)一步檢測(cè)c-mycsiRNA對(duì)LIN28蛋白水平的影響,表明c-mycsiRNA轉(zhuǎn)染后,LIN28的蛋