靶向c-mvc基因小RNA干擾對膽囊癌細胞侵襲運動的影響.pdf

1、目的:通過觀察c-myc對膽囊癌細胞運動和侵襲能力的影響,以論證c-myc在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用,為膽囊癌侵襲和轉(zhuǎn)移干預提供分子靶點。
　　 方法:采用實時定量PCR和westernblot檢測親代和高轉(zhuǎn)移膽囊癌細胞系中c-myc基因表達,設計靶向c-myc的小RNA[smallinterferenceRNA,siRNA]轉(zhuǎn)染高轉(zhuǎn)移的膽囊癌細胞,通過體外侵襲實驗研究c-mycsiRNA對膽囊癌高轉(zhuǎn)移細胞遷移和侵襲能力的影響。此

2、外,通過westernblot方法檢測轉(zhuǎn)染c-mycsiRNA后c-myc下游部分信號通路的變化,進一步研究c-mycsiRNA抑制膽囊癌細胞轉(zhuǎn)移的機制。
　　 結(jié)果:通過實時定量PCR檢測發(fā)現(xiàn),c-myc的RNA水平在GBC-SD/M3細胞中是其在GBC-SD細胞中的2.18倍(p=0.0019);在蛋白水平上,c-myc在GBC-SD/M3中的表達也高于其在GBC-SD中的表達。靶向c-myc的siRNA轉(zhuǎn)染GBC-SD/M

3、3細胞后,與對照相比,c=mycsiRNA能夠有效地抑制c-myc蛋白在GBC-SD/M3細胞中的表達。與對照相比,c-mycsiRNA可以有效的抑制GBC-SD/M3細胞的遷移(p=0.0168)。對GBC-SD/M3細胞的侵襲能力檢測后發(fā)現(xiàn),c-mycsiRNA同樣也能夠有效的抑制GBC-SD/M3細胞的侵襲(p=0.0005)。進一步檢測c-mycsiRNA對LIN28蛋白水平的影響,表明c-mycsiRNA轉(zhuǎn)染后,LIN28的蛋