MTA對大鼠牙乳頭細(xì)胞增殖和分化能力影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 1.體外原代培養(yǎng)大鼠牙乳頭細(xì)胞（rat dental papilla cells，RDPCs），鑒定并觀察其生長狀況，為下一步實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞來源。
　　 2.對比三氧化礦物凝聚體（mineral trioxide aggregate，MTA）和氫氧化鈣對大鼠牙乳頭細(xì)胞增殖和分化能力的影響，為MTA應(yīng)用于根尖誘導(dǎo)成形提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.無菌條件下解剖分離出生1d的SD系大鼠下

2、頜骨磨牙牙胚，組織塊法原代培養(yǎng)RDPCs，純化后鑒定并進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
　　 2.分別用不同濃度的MTA和氫氧化鈣浸提液培養(yǎng)細(xì)胞3d，并設(shè)立空白對照組，通過MTT技術(shù)檢測細(xì)胞增殖活性，篩選兩種藥物最佳作用濃度3.用最適濃度的MTA和氫氧化鈣浸提液作用細(xì)胞，并設(shè)立空白對照組，分別于1、3、5、7d檢測細(xì)胞的增殖能力、分泌的堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活性，于1、3、5d檢測I膠原含量，比較MTA和氫

3、氧化鈣對RDPCs增殖及分化能力的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過石蠟切片HE染色、細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查、免疫組織化學(xué)染色證明所培養(yǎng)細(xì)胞是RDPCs;體外培養(yǎng)的RDPCs呈梭形或星形，生長狀態(tài)良好，原代培養(yǎng)第3天細(xì)胞進(jìn)入生長旺盛期，第7天達(dá)到生長高峰。傳代6次后，細(xì)胞增殖速度變緩、活力降低。
　　 2.高濃度(20mg/ml)的MTA和氫氧化鈣(0.018mg/ml)明顯抑制細(xì)胞生長，低濃度（2mg/m及以下）的M

4、TA和氫氧化鈣（0.012mg/m及以下）可促進(jìn)細(xì)胞增殖，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3.與對照組比較，MTA培養(yǎng)的RDPCs第3、5、7d增殖加速、ALP活性增強(qiáng)，第3、5d I型膠原含量增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與氫氧化鈣比較，MTA培養(yǎng)細(xì)胞第3d時(shí)， ALP活性增強(qiáng)、I型膠原含量增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);第5d時(shí)，MTA和氫氧化鈣組ALP活性與I型膠原含量未見明顯不同，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)