Ca(OH)2和Hoshino’s制劑對豬牙乳頭細胞增殖和成骨分化的影響.pdf

1、目的：探討氫氧化鈣制劑（Ca(OH)2制劑）和三聯(lián)抗生素制劑（Hoshino’s制劑）對體外培養(yǎng)的豬牙乳頭細胞（pDPCs)增殖和成骨分化的影響，以期為臨床使用牙髓血管再生治療時根管消毒藥物的選擇提供一定的理論依據(jù)。
　　材料和方法：本實驗將第4代pDPCs細胞分別接種于含15％胎牛血清（FBS）的DMEM培養(yǎng)液(標準培養(yǎng)液)、含有10%、1%、0.1% Ca(OH)2制劑濃度的DMEM培養(yǎng)液以及含有0.5%、0.1%、0.05%

2、Hoshino’s制劑濃度的DMEM培養(yǎng)液中，分別記為空白對照組（A組）、10%Ca(OH)2組（B1組）、1%Ca(OH)2組（B2組）、0.1%Ca(OH)2組（B3組）和0.5%Hoshino’s組（C1組）、0.1%Hoshino’s組（C2組）、0.05%Hoshino’s組（C3組）。①將各組培養(yǎng)液刺激下的第4代pDPCs細胞分別在培養(yǎng)的第1、3、5、7、9d時，用CCK-8比色法檢測各組OD值，比較各組細胞的增殖情況。②應

3、用BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒，定性檢測各組pDPCs細胞2周時堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP)的表達情況。③通過p–硝基苯磷（p-NPP）ALP試劑盒，定量檢測各組pDPCs細胞兩周時ALP活性。④利用ANOVA（P=0.05）來判斷Ca(OH)2和Hoshino’s制劑對pDPCs細胞的增殖與成骨分化是否有影響。
　　結(jié)果：①CCK-8結(jié)果顯示，體外培養(yǎng)第7d時，各組細胞的生長達到最高峰；

4、第7d時，空白對照組細胞的增殖速度顯著高于Ca(OH)2組細胞，提示 Ca(OH)2制劑抑制了pDPCs細胞的增殖（P<0.05）；體外培養(yǎng)第3d開始，空白對照組細胞的增殖速度顯著高于Hoshino’s組細胞，提示 Hoshino’s制劑可抑制 pDPCs細胞的增殖，第7d時0.5%濃度的Hoshino’s組細胞甚至完全死亡。②BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色實驗顯示，空白對照組、Ca(OH)2組和Hoshino’s組pDPCs細胞ALP

5、染色反應均為陽性，細胞被染成藍紫色，各組pDPCs細胞內(nèi)均有ALP表達。③p-NPP定量檢測ALP結(jié)果顯示，與空白對照組相比較，Ca(OH)2和Hoshino’s組pDPCs細胞的ALP活性明顯上調(diào)，成骨分化能力顯著提高。并且隨著Hoshino’s制劑濃度的增加，pDPCs細胞單位ALP的表達有增加的趨勢.
　　結(jié)論：①Ca(OH)2制劑和Hoshino’s制劑均可抑制pDPCs細胞的增殖；②Ca(OH)2制劑和Hoshino’s