大鼠視網膜干細胞的培養(yǎng)及增殖和分化能力的研究.pdf

1、目前眼科醫(yī)生對一些直接損害視網膜細胞的疾病，如青光眼、視網膜變性疾病等仍無有效的治療辦法，而視網膜干細胞的研究為治療這些疾病帶來了希望。視網膜干細胞的體外培養(yǎng)、增殖和分化的研究已經取得了一定的進展，但也存在著培養(yǎng)體系不統一、增殖和分化機制不明確等問題。對視網膜干細胞的進一步深入研究可以為將來的臨床應用創(chuàng)造條件。
　　 [目的]探索應用改良的方法培養(yǎng)大鼠視網膜干細胞，并比較不同年齡段大鼠視網膜干細胞增殖和分化能力的差異。
　

2、　 [方法]使用含血清培養(yǎng)基直接培養(yǎng)的方法對取材于15日齡胚鼠、出生24h內大鼠和出生5d大鼠視網膜神經層的視網膜混合細胞進行培養(yǎng)和傳代。使用免疫熒光染色和RT-PCR的方法研究視網膜干細胞的增殖和分化情況，并比較不同年齡段大鼠之間的差異。
　　 [結果]改良的培養(yǎng)方法成功地培養(yǎng)了大鼠視網膜干細胞并進行了傳代。免疫熒光染色顯示隨著傳代的進行，視網膜干細胞增殖并占據優(yōu)勢，同時逐漸向神經節(jié)細胞方向分化。RT-PCR顯示隨著傳代的進

3、行，15日齡胚鼠視網膜干細胞的Musashi和NestinmRNA表達水平基本不變，Thy-1mRNA表達水平逐漸上升；出生24h內大鼠視網膜干細胞的MusashimRNA表達水平基本不變，NestinmRNA逐漸下降，Thy-1mRNA表達水平逐漸上升；出生5d大鼠視網膜干細胞的Musashi和NestinmRNA表達水平逐漸下降，Thy-1mRNA表達水平逐漸上升。
　　 [結論]改良的培養(yǎng)方法對于培養(yǎng)和傳代干細胞是穩(wěn)定而可