白茅根多糖對IgA腎病大鼠免疫調節(jié)及腎纖維化的干預.pdf

1、目的：探討免疫調節(jié)紊亂與轉化生長因子-β1(TGF-β1)、補體應答基因-32(RGC-32)表達在大鼠IgA腎病腎纖維化的作用及白茅根多糖(RIP)治療IgA腎病的機制。
　　方法：①動物部分:50只大鼠隨機分為正常對照組,模型組,白茅根多糖高劑量組,白茅根多糖低劑量組,地塞米松組,每組10只,運用口服牛血清白蛋白和靜脈注脂多糖(LPS)及皮下注射四氯化碳(CCl4)的復合方法制造IgAN大鼠模型。RIP高,低劑量及地塞米松組分

2、別給予RIP(20,10mg·kg-1·d-1),地塞米松(2mg·kg-1·d-1)灌胃4周,觀察各組大鼠尿紅細胞、尿蛋白、肌酐、尿素氮、腎組織IgA免疫熒光和電鏡形態(tài)以及血清IL-2、IL-6水平。免疫組化及PT-PCR法測定各組大鼠腎臟組織TGF-β1、RGC-32含量及基因表達水平;②細胞部分:根據IgA腎病大鼠模型的血清IL-2和IL-6濃度各設置3個濃度梯度(IL-2:10,30,90pg/ml;IL-6:100,300,6

3、00pg/ml),分別單獨和聯(lián)合干預腎小管上皮細胞,采用免疫組化的方法檢測轉化生長因子β1(TGF-β1)在各組細胞的表達。
　　結果：①模型大鼠在第8周均出現(xiàn)了肉眼血尿及蛋白尿,免疫熒光可見明顯IgA在腎小球沉積,電鏡下可見腎小球系膜細胞增生,毛細血管袢塌陷,足突融合大鼠IgA腎病模型造模成功;與模型組相比:各治療組血尿、蛋白尿、肌酐、尿素氮顯著降低,光鏡觀察各治療組腎小球系膜細胞和系膜基質增生程度均有一定程度緩解,電鏡觀察電子

4、致密物沉積、系膜細胞增生、足突融合明顯改善,免疫熒光提示IgA沉積明顯減少(P<0.05);RIP高劑量組血清IL-2和IL-6水平明顯降低(P<0.01);RIP組免疫組化及PT-PCR結果顯示TGF-β1、RGC-32蛋白表達水平明顯降低(P<0.01)。②IL-2單獨干預對腎小管上皮細胞TGF-β1表達無影響(p>0.05);而IL-6能直接增加腎小管上皮細胞TGF-β1表達(p<0.01)。IL-2和IL-6對腎小管上皮細胞TG